换一批白背飞虱酵母双杂交cDNA文库的构建
Construction of yeast two-hybrid cDNA library of white-backed planthopper (Sogatella furcifera)
摘要白背飞虱(Sogatella furcifera Horváth)作为一种迁飞性害虫,不仅自身危害水稻,而且以持久性方式传播南方水稻黑条矮缩病毒(Southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV).为了研究白背飞虱与SRBSDV之间的相互作用,需要构建一个高质量的酵母筛选文库,试验利用Gateway技术构建了白背飞虱cDNA酵母表达文库,检测分析显示,白背飞虱初级文库库容量约为1.72×107 CFU,cDNA插入片段主要分布在500~2000 bp,重组率约为95.8%;次级文库库容量约为1.73×107 CFU,cDNA插入片段主要分布在400~2000 bp,重组率为100%;Y187酵母菌株的白背飞虱酵母双杂交cDNA文库库容量约5.09×107 CFU,插入片段大小在750~2000 bp,重组率100%,再随机挑选36个单克隆进行测序分析,所得结果与GenBank数据库比对显示36个克隆中含有22个不同的基因,长度在750~2000 bp,这些分析表明,该文库可以用于酵母双杂交的后续筛选,为研究白背飞虱与SRBSDV之间的互作奠定了基础.
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关键词
白背飞虱南方水稻黑条矮缩病毒(SRBSDV)Gateway技术酵母双杂交cDNA文库white-backed planthopper ( Sogatella furcifera Horváth )Southern rice black-streaked dwarf virus (SRBSDV)Gateway techniqueyeast two-hybridcDNA library
分类号
S435.11
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1004-1524.2017.12.14
发布时间
2018-01-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
湖南省教育厅科学研究项目（16C0773）
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