摘要目的:通过观察艾灸天枢及上巨虚对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)大鼠中脑组织微小RNA-133b(miRNA-133b)、垂体同源盒家族因子3(Pitx3)/酪氨酸羟化酶(TH)及神经递质的影响,探讨艾灸治疗IBS-D的作用机制.方法:将健康Sprague-Dawley大鼠随机分为正常组、模型组、艾灸组和西药组,每组12只.除正常组外,其余各组采取母子分离及醋酸灌肠联合束缚应激刺激方法建立IBS-D大鼠模型.正常组和模型组不干预;艾灸组取双侧天枢及上巨虚施以温和灸;西药组予利福昔明灌胃.观察各组大鼠不同时期体征状况.干预后,苏木素-伊红染色观察大鼠结肠组织病理形态,酶联免疫吸附法检测各组大鼠血浆、结肠及中脑组织中多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)及5-羟色胺(5-HT)含量,实时荧光定量聚合酶链反应法检测中脑组织中miRNA-133b、Pitx3及TH mRNA的相对表达量,免疫印迹法及免疫荧光法检测中脑组织中Pitx3及TH蛋白的相对表达量.结果:不同组间、不同时间点各组大鼠体重均有统计学差异(P<0.01).随着时间延长,正常组体重高于其他各组(P<0.01).造模后,与正常组比较,模型组、艾灸组和西药组大鼠腹部回缩反射(AWR)最小容量阈值显著降低(P<0.01),稀便率显著升高(P<0.01);中脑组织中miRNA-133b表达水平显著降低(P<0.01),中脑组织中Pitx3及TH表达水平显著升高(P<0.01),血浆、结肠及中脑组织中DA、NE及5-HT含量显著升高(P<0.01).干预后,与模型组比较,艾灸组及西药组大鼠AWR最小容量阈值显著升高(P<0.01),稀便率显著降低(P<0.01);中脑组织中miRNA-133b表达水平显著升高(P<0.01或P<0.05),Pitx3及TH表达水平显著降低(P<0.01);血浆、结肠及中脑组织中DA、NE及5-HT含量显著降低(P<0.01).艾灸组结肠中NE及中脑组织中5-HT含量显著低于西药组(P<0.05),其余各项组间无统计学差异(P>0.05).线性相关性分析表明,miRNA-133b与Pitx3呈负相关(r<0,P<0.01);Pitx3与TH、TH与DA、NE及5-HT呈正相关(r>0,P<0.01).结论:艾灸天枢及上巨虚可改善IBS-D大鼠腹泻症状和内脏高敏感性,其机制可能与上调中脑miRNA-133b抑制Pitx3/TH的表达,降低神经递质的表达水平有关.