隔药饼灸对动脉粥样硬化兔血清外泌体miR-223表达的影响
Effect of herb cake-insulated moxibustion on serum exosomal miR-223 expression in rabbits with atherosclerosis
摘要目的:探讨隔药饼灸是否通过调控外泌体miR-223表达影响胆固醇代谢相关蛋白3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGR)的表达,抑制动脉粥样硬化的发展.方法:将36只雄性新西兰兔随机均分为正常组、模型组和隔药饼灸组,每组12只.模型组和隔药饼灸组采用高脂饲料饲养8周制备动脉粥样硬化模型.模型成功后,隔药饼灸组捆绑后进行隔药饼灸干预;其他2组仅做相同的捆绑.干预8周后,采用苏木素-伊红(HE)染色观察主动脉形态;全自动生化仪检测各组血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量水平;透射电镜观察外泌体形态;免疫印迹(WB)法检测血清外泌体中CD63、CD9标志蛋白以及肝组织HMGR蛋白的表达量;实时荧光定量聚合酶链反应检测血清外泌体中miR-223的含量.结果:HE染色见模型组主动脉内膜增厚,脂质浸润、泡沫细胞聚集,动脉壁结构完整度受损.造模后,与正常组比较,模型组和隔药饼灸组动物血清中LDL-C、TC和TG含量显著升高(P<0.05),结合HE染色切片分析提示动脉粥样硬化兔模型制备成功.电镜观察模型组兔血清外泌体为茶托样状或半凹陷球状,直径为120-150 nm;WB检测结果显示蛋白标志物CD63、CD9在外泌体中表达呈阳性.干预8周后,与正常组相比,模型组miR-223表达显著下降(P<0.01);与模型组相比,隔药饼灸组血清中TC、TG及LDL-C含量显著降低(P<0.05),miR-223表达明显上升(P<0.01),肝组织HMGR蛋白相对含量下降(P<0.05).结论:隔药饼灸可能是通过上调外泌体miR-223表达,下调HMGR蛋白表达来抑制胆固醇合成代谢,从而缓解动脉粥样硬化病程.
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