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艾灸对克罗恩病大鼠结肠H3K27乙酰化的调节作用研究

Study on the regulation effect of moxibustion on colonic H3K27 acetylation in rats with Crohn disease

摘要目的:观察艾灸对克罗恩病(CD)大鼠的干预效应,探讨干预效应与结肠组蛋白H3第27位赖氨酸(H3K27)乙酰化(H3K27ac)作用水平变化的关系.方法:根据随机数字表法从36只Sprague-Dawley大鼠中随机挑选10只作为对照组,其余26只大鼠采用2,4,6三硝基苯磺酸(TNBS)灌肠制备大鼠CD模型.将造模成功的大鼠根据随机数字表法分为模型组、隔药灸组和柳氮磺吡啶组,每组8只.隔药灸组和柳氮磺吡啶组分别采用隔药灸气海、双侧天枢和柳氮磺吡啶灌胃干预.运用苏木素-伊红染色观察CD大鼠结肠组织病理变化.酶联免疫吸附法检测血清炎症因子[肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β和IL-6]水平.免疫印迹法及免疫组化检测结肠H3K27ac蛋白表达.实时荧光定量逆转录聚合酶链反应和免疫荧光检测赖氨酸乙酰转移酶2B(KAT2B)、一般控制非阻遏蛋白5(GCN5)和组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)、组蛋白去乙酰化酶3(HDAC3)mRNA和蛋白表达情况.结果:与对照组比较,模型组结肠组织病理学评分、血清炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6蛋白含量和结肠GCN5、HDAC1、HDAC3 mRNA和蛋白表达均显著升高(P<0.01或P<0.05),H3K27ac蛋白、KAT2B mRNA和蛋白表达均显著降低(P<0.01或P<0.05).与模型组比较,隔药灸组大鼠结肠黏膜损伤明显改善,结肠组织病理学评分、TNF-α、IL-1β、IL-6的蛋白含量和GCN5、HDAC1、HDAC3 mRNA和蛋白表达均显著降低(P<0.01或P<0.05),H3K27ac蛋白和KAT2B mRNA和蛋白表达均显著升高(P<0.01或P<0.05).柳氮磺吡啶组与隔药灸组比较,上述指标差异无统计学意义.结论:艾灸能够减轻CD大鼠结肠炎症反应;可能与上调结肠组织KAT2B表达,同时下调GCN5、HDAC1和HDAC3的表达,从而增加H3K27ac水平有关.

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