换一批
换一批RNA干扰技术干涉后核糖体蛋白S15a在胃癌中的表达及意义
Knock-down of RPS15a by siRNA inhibits proliferation of gastric cancer BGC823 cells
摘要目的：探讨RNA干扰（RNAi）技术干涉后核糖体蛋白S15a（RPS15a）在胃癌中的表达及意义。方法选取12例胃癌患者手术切除的胃癌组织，利用RNAi干涉RPS15a基因，将小片段克隆到质粒中，分别提取质粒后转染胃癌细胞BGC823。将未转染、随机小片段转染非编码序列、siRPS15a-1转染、siRPS15a-2转染的BGC823细胞分为BGC823- WT组、siNC组、siRPS15a-1组、siRPS15a-2组，RT- PCR法及Western blot分别检测各组RPS15a RNA及蛋白的表达情况，流式细胞仪检测细胞增殖的变化。结果 RNAi后细胞中出现了明显的绿色荧光，提示此转染方式是可行的。转染检测结果表明，本实验提取的RNA未受到质粒DNA的污染，可以进行表达的比较。siRPS15a-1组、siRPS15a-2组RNA及蛋白表达相对灰度比值与BGC- WT组、siNC组比较，差异均有统计学意义（均P＜0.05），BGC- WT组与siNC组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。RNAi后细胞增殖速度显著下降，多数细胞集中在G0/G1期。结论 RNAi技术不仅可以下调RPS15a在胃癌中表达，而且还可以抑制胃癌细胞的增殖活性。
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