单纯疱疹病毒Ⅱ型感染对生殖道上皮细胞间紧密连接和单核细胞趋化性影响的初步研究

Effect of HSV-2 infection on tight junction of genital epithelial cells and chemotaxis of monocytes

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摘要目的探讨人类单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)感染对生殖道上皮细胞间紧密连接的影响及对单核细胞的趋化作用.方法通过以人子宫内膜腺癌细胞(HEC-1-A)小室培养模型为基础建立生殖道体外单层细胞致密层模型,低剂量HSV-2感染后(MOI=0.1),检测体外细胞活力;通过检测跨膜电阻判断细胞间紧密连接程度的变化;采用Western blot、荧光定量PCR法观察细胞紧密连接蛋白ZO-1、E-cadherin和Occuldin的表达情况;通过单核细胞趋化反应实验来检测感染HSV-2的HEC-1-A细胞培养上清液的趋化效应.结果与阴性对照组(Mock组)相比,HSV-2(MOI=0.1)感染使HEC-1-A单层细胞致密层跨膜电阻逐渐降低,且在感染中后期下降明显(P＜0.01),而细胞活力无显著变化(均＞80％);随着HSV-2病毒感染,ZO-1蛋白表达水平逐渐降低,在感染60h,该蛋白表达水平最低,而其mRNA表达水平无显著变化(P＞0.05),E-cadherin和Occuldin均无显著变化(均P＞0.05);HSV-2感染HEC-1-A后的细胞上清液可诱导单核细胞产生明显的趋化反应(P＜0.01).结论低剂量HSV-2持续感染可降低HEC-1-A单层细胞致密层跨膜电阻,破坏细胞间紧密连接,很可能与下调ZO-1表达水平相关;感染后的细胞上清液可产生某种特殊的趋化分子介导免疫细胞向感染区域迁移浸润.