阳离子聚合物携带HIF-1α基因传递对小鼠后肢缺血的影响
PC mediated HIF-1α gene delivery for treatment of hind limb ischemia in mouse model
摘要目的 研究阳离子聚合物(PC)携带缺氧诱导因子1α(HIF-1α)基因传递对C57BL/6小鼠后肢缺血模型血管再生的影响.方法 PC经静电作用结合HIF-1α为PC-HIF-1α,在人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)完成细胞转染实验,18只C57BL/6小鼠构建后肢缺血模型成功后,按随机数字表法分为PBS组、PC组和PC-HIF-1α组,每组6只.术后第1、3、5天,PBS组在小鼠左后肢腓肠肌肌肉注射100 μL PBS,在同样的时间和部位,PC组肌肉注射100 μL PC溶液,PC-HIF-1α组肌肉注射100 μL PC-HIF-1α.7 d后,取小腿缺血侧腓肠肌,行血小板-内皮细胞黏附分子CD31免疫荧光染色.观察PC-HIF-1α粒径及HUVECs细胞对PC-HIF-1α的摄取情况以判断3组小鼠缺血后的血流恢复情况.结果 PC-HIF-1α粒径为150~200 nm;PC-HIF-1α的细胞摄取效率较高,且依赖于细胞骨架.PC-HIF-1α组左后肢与右后肢的血流灌注比恢复到86.00%,而PBS组和PC组仅为50.17%和51.00%,与PBS和PC组相比,PC-HIF-1 α组血流灌注比显著增加(P<0.01);在显微镜同一视野下,与PBS和PC组相比,PC-HIF-1α组血管数量显著增加(P<0.01),且缺血区域纤维母细胞增生.结论 PC-HIF-1α治疗可以促进缺血肢体侧支循环的建立.
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