摘要目的 探讨ALKB同源物5(ALKBH5)靶向调控肌联蛋白(Titin)基因表达,并介导无翅型小鼠乳房肿瘤病毒整合位点家族蛋白(Wnt)/β-连锁蛋白(β-catenin)信号通路参与宫颈癌生物学行为的相关机制.方法 回顾性选取2022年10月至2023年10月经金华市中心医院病理诊断为宫颈良性肿瘤、上皮不典型增生以及浸润性癌患者各30例并收集其手术切除获取的新鲜宫颈组织,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测ALKBH5和Titin mRNA表达水平.体外选择宫颈癌细胞株 Hela 并分为 5 组,即正常对照(NC)组、ALKBH5-小干扰 RNA(siRNA)组、ALKBH5-NC 组、ALKBH5-siRNA+Titin-模拟物(mimic)组和ALKBH5-siRNA+Titin-NC组;连续培养72 h,分别采用四甲基偶氮唑蓝法、流式细胞术、划痕实验、Transwell法检测细胞增殖率、凋亡率、迁移率以及侵袭细胞数,蛋白质印迹法检测上皮间质转化相关蛋白波形蛋白(Vimentin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和 E-钙黏蛋白(E-cadherin)以及 Wnt、β-catenin 蛋白表达水平,qRT-PCR 检测细胞 ALKBH5 和 Titin mRNA 表达水平.采用荧光素酶法检测ALKBH5与Titin基因的靶向作用.结果 与宫颈良性肿瘤组织、上皮不典型增生组织相比,浸润性癌组织中ALKBH5和Titin mRNA表达水平均明显升高(均P＜0.01).与NC组、ALKBH5-NC组相比,ALKBH5-siRNA组细胞增殖率、迁移率均下降(均P＜0.05),侵袭细胞数均减少(均P＜0.05),凋亡率均升高(均P＜0.05),E-cadherin蛋白表达水平均上调(均P＜0.05),Vimentin、N-cadherin、Wnt、β-catenin蛋白表达水平以及ALKBH5、Titin mRNA表达水平均下调(均 P＜0.05);与 ALKBH5-siRNA 组、ALKBH5-siRNA+Titin-NC 组相比,ALKBH5-siRNA+Titin-mimic 组细胞增殖率、迁移率均升高(均P＜0.05),侵袭细胞数均增加(均P＜0.05),凋亡率均下降(均P＜0.05),E-cadherin蛋白表达水平均下调(均P＜0.05),Vimentin、N-cadherin、Wnt、β-catenin 蛋白表达水平以及 Titin mRNA 表达水平均上调(均 P＜0.05).荧光素酶报告显示了 ALKBH5与Titin基因的靶向作用位点(225-231位点),并且ALKBH5与Titin-野生型的相对荧光强度高于Titin-突变型(P＜0.001).结论 ALKBH5能靶向上调Titin基因表达,并激活Wnt/β-catenin信号通路促进宫颈癌的发生以及恶性肿瘤生物学行为.