缺氧微环境下tRF-20对三阴性乳腺癌细胞生物学行为的影响及机制研究
Effects and mechanisms of tRF-20 on biological behaviors of triple-negative breast cancer cells in a hypoxic microenvironment
摘要目的 探究缺氧微环境下tRNA衍生片段(tRF)-20对三阴性乳腺癌(TNBC)细胞生物学行为的影响及潜在机制.方法 采用高通量测序筛选缺氧与常氧条件下差异表达的tRFs,采用qRT-PCR验证tRF-20表达水平.通过Transwell细胞侵袭与迁移实验、克隆形成实验检测tRF-20过表达或抑制对TNBC细胞侵袭、迁移及克隆形成能力的影响.采用蛋白质印迹法分析上皮-间质转化(EMT)相关蛋白[上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、神经钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)]、基质金属蛋白酶(MMPs)及干细胞标志物(八聚体结合转录因子4、同源盒基因、Y染色体性别决定盒蛋白2)的表达变化.结果 缺氧显著上调TNBC细胞中tRF-20表达.tRF-20过表达增强细胞侵袭、迁移及克隆形成能力,上调N-cadherin、vimentin、MMPs及干细胞标志物表达,下调E-cadherin;抑制tRF-20可逆转缺氧诱导的细胞恶性表型及蛋白表达异常.结论 缺氧微环境通过上调tRF-20促进TNBC细胞的侵袭、迁移和克隆形成,其机制可能与调控EMT进程及干细胞特性相关,tRF-20或成为TNBC治疗的潜在靶点.
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