灯盏花素调节lncRNA NEAT1/miR-9-5p/SLC26A2 轴抑制哮喘模型小鼠气道炎症

Breviscapine alleviates airway inflammation via regulating the lncRNA NEAT1/miR-9-5p/SLC26A2 axis in an asthma mouse model

二维码有效期 120s

摘要目的探究灯盏花素通过长链非编码RNA(lncRNA)NEAT1/microRNA(miR)-9-5p/SLC26A2轴对哮喘模型小鼠气道炎症的抑制作用及分子机制.方法 15只6～8周雄性C57BL/6J小鼠,按照随机数字表法分为三组,即对照组、哮喘模型组和灯盏花素组.灯盏花素组小鼠在哮喘模型构建完成后每天1次灌胃10mg/kg灯盏花素,连续7d;对照组及哮喘模型组则使用等体积0.9％生理盐水进行灌胃处理.采用苏木素-伊红(HE)染色和过碘酸雪夫(PAS)染色对小鼠肺组织进行组织病理学观察.采用Wright-Giemsa对支气管肺泡灌洗液(BALF)进行染色及细胞学检测.酶联免疫吸附实验检测BALF及血清中炎性因子的水平.荧光原位杂交检测NEAT1的表达.实时荧光定量PCR检测lncRNA-NEAT1、miR-9-5p和SLC26A2 mRNA的表达.蛋白免疫印迹检测SLC26A2的蛋白表达.结果与对照组比较,哮喘模型组小鼠的BALF炎性细胞总数[(68.32±7.25)×104/mL 比(17.71±3.14)×104/mL,P＜0.01]、中性粒细胞数[(5.50±0.58)×104/mL 比(0.72±0.15)×104/mL,P＜0.01]、巨噬细胞数[(13.02±1.04)×104/mL 比(2.70±0.61)×104/mL,P＜0.01]、淋巴细胞数[(23.07± 2.90)×104/mL 比(4.13±0.53)×104/mL,P＜0.01]、嗜酸性粒细胞数[(22.13±2.21)×104/mL 比(1.63±0.22)×104/mL,P＜0.01]增加;肺组织炎性细胞浸润水平增加[(2.49±0.25)分比(0.26±0.04)分,P＜0.01],PAS评分升高[(2.24±0.16)分比(0.26±0.08)分,P＜0.01];血清 IgE[(3.52±0.32)IU/mL 比(1.02±0.08)IU/mL,P＜0.01]及 BALF 中白细胞介素-5(IL-5)[(154.48±9.27)pg/mL 比(54.56±3.35)pg/mL,P＜0.01]、白细胞介素-13(IL-13)[(96.86±6.45)pg/mL 比(79.18±3.34)pg/mL,P＜0.05]、白细胞介素-17(IL-17)[(185.24±7.24)pg/mL 比(73.32±4.15)pg/mL,P＜0.01]表达上升,干扰素-γ(INF-γ)表达下降[(48.46±3.81)pg/mL比(84.76±2.91)pg/mL,P＜0.01].与哮喘模型组比较,灯盏花素组小鼠BALF炎性细胞总数[(52.10±7.59)×104/mL 比(68.32±7.25)×104/mL,P＜0.05]、中性粒细胞数[(4.21±0.54)×104/mL比(5.50±0.58)×104/mL,P＜0.05]、巨噬细胞数[(3.61±0.28)×104/mL 比(13.02±1.04)×104/mL,P＜0.01]、淋巴细胞数[(9.52±1.23)×104/mL 比(23.07±2.90)×104/mL,P＜0.01]、嗜酸性粒细胞数[(8.87±1.33)× 104/mL 比(22.13±2.21)×104/mL,P＜0.01]降低;肺组织炎性细胞浸润水平[(1.46±0.15)分比(2.49± 0.25)分,P＜0.01]及 PAS 评分降低[(0.58±0.07)分比(2.24±0.16)分,P＜0.01];血清 IgE[(1.83±0.14)I-U/mL 比(3.52±0.32)IU/mL,P＜0.01]及 BALF 中 IL-5[(78.25±4.44)pg/mL 比(154.48±9.27)pg/mL,P＜0.01]、IL-13[(59.34±5.32)pg/mL 比(96.86±6.45)pg/mL,P＜0.01]、IL-17[(125.60±5.88)pg/mL 比(185.24±7.24)pg/mL,P＜0.01]表达下降,INF-γ[(65.48±4.49)pg/mL 比(48.46±3.81)pg/mL,P＜0.05]表达上升.与对照组比较,哮喘模型组小鼠肺组织中NEAT1[(3.96±0.32)比(1.00±0.15),P＜0.01]、SLC26A2相对表达上升[(3.91±0.32)比(1.00±0.08),P＜0.01],miR-9-5p相对表达量显著下降[(0.48±0.07)比(1.00±0.09),P＜0.01].与哮喘模型组比较,灯盏花素组小鼠NEAT1[(1.82±0.28)比(3.96±0.32),P＜0.01]、SLC26A2 相对表达降低[(2.00±0.23)比(3.91±0.32),P＜0.01],miR-9-5p 相对表达增加[(0.67±0.06)比(0.48±0.07),P＜0.05].结论灯盏花素可能通过调节lncRNA NEAT1/miR-9-5p/SLC26A2轴抑制哮喘小鼠的气道炎症.