摘要目的 探究丹栀逍遥散(DXP)对喉鳞状细胞癌(LSCC)恶性进展的影响及其具体分子机制.方法 体外实验:人LSCC细胞系AMC-HN-8 细胞随机分为阴性对照(Control)组、正常大鼠血清(NS)组、低剂量(10%)DXP含药血清(DS-L)组、高剂量(20%)DXP含药血清(DS-H)组、DS-H+线粒体分裂抑制剂 1(Mdivi-1)组、DS-H+对照空质粒(oe-NC)组和DS-H+果蝇双翅边缘缺刻同源基因 1(Notch1)过表达质粒(oe-Notch1)组.使用高、低剂量DXP含药血清处理AMC-HN-8 细胞,加入Mdivi-1 或转染oe-Notch1 及oe-NC干预AMC-HN-8 细胞.体内实验:将Balb/c裸鼠随机分为对照(Control,生理盐水)组、DXP低剂量(DXP-L,6 g/kg)组和DXP高剂量(DXP-H,12 g/kg)组,每组 6 只.将AMC-HN-8 细胞接种至Balb/c裸鼠皮下构建LSCC皮下瘤模型,使用高、低剂量DXP灌胃干预.使用细胞计数试剂盒 8(CCK-8)检测细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡水平;跨膜(Transwell)侵袭实验和细胞划痕实验检测细胞侵袭和迁移能力;免疫荧光检测细胞线粒体自噬水平;蛋白免疫印迹(WB)检测细胞和Balb/c裸鼠皮下瘤组织中线粒体自噬和Notch1-锯齿典型Notch配体 1(Jagged1)通路相关蛋白微管相关蛋白轻链 3Ⅱ与Ⅰ的比值(LC3Ⅱ/Ⅰ)、泛素结合蛋白p62(p62)、线粒体内膜转位酶 23(Tim23)、E3 泛素-蛋白连接酶(PARKIN)、Notch1、Jagged1 的表达.结果 体外实验:与NS组比较,DS-L、DS-H组细胞活性[(0.73±0.04)、(0.56±0.07)比(0.96±0.09),P<0.05]显著下降,凋亡率[(11.26±1.06)%、(18.92±0.77)%比(5.18±0.35)%,P<0.05]显著上升,细胞侵袭[(36.00±3.61)个、(15.67±1.53)个比(86.33±3.79)个,P<0.05]和迁移[(52.48±2.30)%、(24.07±2.07)%比(77.67±2.13)%,P<0.05]能力显著下降,线粒体自噬水平[(23.17±0.95)、(26.70±1.08)比(12.93±0.74),P<0.05]上升,LC3Ⅱ/Ⅰ[(2.55±0.08)、(3.21±0.09)比(0.81±0.02),P<0.05]和PARKIN[(0.58±0.07)、(0.88±0.06)比(0.30±0.01),P<0.05]表达显著升高,p62[(0.56±0.03)、(0.42±0.03)比(1.03±0.05),P<0.05]和 Tim23[(0.43±0.02)、(0.26±0.06)比(0.90±0.06),P<0.05]表达显著下降,Notch1[(0.43±0.12)、(0.17±0.03)比(0.92±0.03),P<0.05]和 Jagged1[(0.37±0.05)、(0.07±0.05)比(0.90±0.01),P<0.05]表达显著下降,呈剂量依赖关系.与DS-H组比较,DS-H+Mdivi-1 组细胞活性[(0.71±0.05)比(0.56±0.07),P<0.05]显著升高,凋亡率[(11.23±0.18)%比(18.92±0.77)%,P<0.05]显著降低,细胞侵袭[(31.67±2.52)个比(15.67±1.53)个,P<0.05]和迁移[(40.66±0.69)%比(24.07±2.07)%,P<0.05]能力显著升高,LC3Ⅱ/Ⅰ[(0.21±0.03)比(0.60±0.01),P<0.05]、PARKIN[(0.82±0.01)比(1.04±0.03),P<0.05]表达降低,p62[(0.55±0.03)比(0.34±0.02),P<0.05]、Tim23[(0.71±0.01)比(0.53±0.02),P<0.05]表达升高.与DS-H+oe-NC组比较,DS-H+oe-Notch1 组细胞活性[(0.74±0.03)比(0.62±0.03),P<0.05]显著升高,凋亡率[(9.97±0.15)%比(17.95±0.84)%,P<0.05]显著降低,细胞侵袭[(34.00±2.00)个比(14.67±0.47)个,P<0.05]和迁移[(46.22±2.99)%比(25.74±1.25)%,P<0.05]能力显著升高,LC3Ⅱ/Ⅰ[(0.22±0.02)比(0.42±0.02),P<0.05]、PARKIN[(0.78±0.04)比(1.07±0.04),P<0.05]显著降低,p62[(0.82±0.01)比(0.63±0.02),P<0.05]、Tim23[(0.44±0.02)比(0.19±0.01),P<0.05]显著升高.体内实验:与Control组比较,DXP-H、DXP-L组小鼠皮下瘤体积[(585.75±73.37)mm3、(759.64±57.32)mm3 比(920.09±98.58)mm3,P<0.05]和质量[(0.59±0.09)g、(0.73±0.07)g比(0.95±0.13)g,P<0.05]显著下降,LC3Ⅱ/Ⅰ[(0.82±0.09)、(0.56±0.10)比(0.25±0.05),P<0.05]和PARKIN[(0.80±0.11)、(0.60±0.10)比(0.26±0.04),P<0.05]表达升高,p62[(0.26±0.09)、(0.55±0.15)比(1.02±0.16),P<0.05]和Tim23[(0.17±0.07)、(0.40±0.05)比(1.01±0.13),P<0.05]表达下降,Notch1[(0.25±0.07)、(0.57±0.10)比(1.06±0.24),P<0.05]、Jagged1[(0.37±0.06)、(0.60±0.10)比(1.02±0.19),P<0.05]表达下降.结论 DXP通过调节Notch1-Jagged1通路诱导LSCC细胞线粒体自噬从而抑制其恶性进展.