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人胃癌细胞Caveolin-1基因的表达与DNA甲基化修饰之间的关系研究

The Interaction Between Expression and Methylation Status of Caveolin-1 Gene in Human Gastric Cancer Cells

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摘要[目的]观察胃癌细胞系中小窝蛋白-1(Caveolin-1,Cav-1)基因不同亚型的表达水平,探讨影响其基因转录调控的甲基化修饰途径.[方法]选择Cav-1基因表达水平不同的胃癌细胞系,应用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction,Real-time qPCR)检测不同胃癌细胞系中Cav-1基因的两个亚型α和β的mRNA水平,之后利用磷酸胞苷酰(基)鸟苷(cytidylyl phosphate guanosine,CpG)岛在线预测软件对其启动子区和第一外显子区CpG岛分布情况进行分析,最后应用甲基化qPCR对其甲基化水平进行检测.[结果]Real-time qPCR结果显示,人胃癌细胞MGC-803中Cav-1以及Cav-1α的表达分别是人正常胃黏膜上皮细胞GES1的(1.782±0.489)倍和(2.604±0.945)倍,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);人胃癌细胞AGS中的Cav-1以及Cav-1α的表达则仅是GES1细胞的(0.017±0.002)倍和(0.0005±0.00003)倍,差异均有统计学意义(P<0.001,P<0.001).相对于GES1细胞,MGC-803细胞和AGS细胞中Cav-1β的mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05).利用CpG岛在线预测软件分析结果表明,人Cav-1α基因的启动子区存在一个174bp大小的CpG岛,该岛位于相对于转录起始位点(transcription start stecte,TSS)+1的-250～-77区域内,包含了17个CG位点.甲基化qPCR检测发现,Cav-1α基因启动子区-158～-77区域处于去甲基化状态,则Cav-1α的mRNA表达水平较高,相反,该区域处于高度甲基化状态,则其mRNA表达较低.[结论]人胃癌细胞中Cav-1的表达主要与其α亚型的表达相关,与β亚型无关;并且其启动子区CpG岛内-158～-77区域的甲基化修饰程度与其mRNA转录调控水平密切相关.

作者毛立祺 ^[1] 戴春艳 ^[2] 金威洋 ^[3] 傅宇斐 ^[2] 陈喆 ^[2] 吕宾 ^[2] 王曦 ^[2] 学术成果认领

作者单位浙江中医药大学附属第一医院浙江省消化道疾病病理生理研究重点实验室杭州 310006;湖州市第一人民医院 ^[1] 浙江中医药大学附属第一医院浙江省消化道疾病病理生理研究重点实验室杭州 310006 ^[2] 杭州师范大学生命与环境科学学院 ^[3]

关键词小窝蛋白-1 亚型胃癌甲基化启动子区 CpG岛转录调控基因表达

分类号 R331（人体生理学）

栏目名称

论著

DOI 10.16466/j.issn1005-5509.2021.09.001

发布时间 2021-10-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

基金项目

浙江省医药卫生科技计划（2019RC228）浙江省医药卫生科技计划（2019RC229）浙江省自然科学基金（LQ14H160014）浙江省自然科学基金（LY21H030002）国家自然科学基金（81503297）国家自然科学基金（81400594）国家自然科学基金（81603340）国家自然科学基金（81773945）国家自然科学基金（81770535）