川芎嗪调控miR-139-5p/CXCR4通路促进骨髓间充质干细胞迁移
Tetramethylpyrazine Promotes Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells Migration by Regulating miR-139-5p/CXCR4
摘要[目的]探讨川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)是否通过调控miR-139-5p/趋化因子受体4(chemokine receptor 4,CXCR4)促进骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)迁移.[方法]采用全骨髓贴壁法培养SD大鼠BMSCs,50、100 μmol·L-1的 TMP 预处理 BMSCs 24 h,脂质体 3000 转染 miR-139-5p mimic、inhibitor,以细胞划痕和 Transwell 实验检测 BMSCs 迁移能力,双萤光素酶报告基因系统检测miR-139-5p与CXCR4之间的靶向性,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction,Real-time qPCR)检测 miR-139-5p表达,免疫印迹法检测 CXCR4蛋白表达.[结果]与正常对照组比较,转染miR-139-5p mimic后,细胞划痕愈合减慢(P<0.01),Transwell小室迁移的细胞数量减少(P<0.01),CXCR4蛋白表达下调(P<0.05),而转染miR-139-5p inhibitor的作用相反.双萤光素酶报告基因检测结果表明,CXCR4是miR-139-5p的潜在靶基因(P<0.01).与正常对照组比较,50、100 μmol·L-1 TMP预处理均下调miR-139-5p表达(P<0.01);与TMP组比较,TMP+miR-139-5p mimic组划痕愈合减慢(P<0.01),Transwell小室迁移的细胞数量减少(P<0.01),CXCR4蛋白表达下调(P<0.01),TMP+miR-139-5p mimic NC组无明显变化(P>0.05).[结论]TMP可促进BMSCs迁移,其机制可能与下调miR-139-5p,增加CXCR4的表达有关.
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