保元解毒汤对癌性恶病质小鼠肝脏脂质及肝脏线粒体功能的影响
Effect of Baoyuan Jiedu Decoction on Liver Lipids and Liver Mitochondrial Function in Cancer Cachexia Mice
摘要[目的]探究保元解毒汤对癌性恶病质小鼠肝脏脂质及肝脏线粒体功能的影响.[方法]使用Lewis肺癌细胞皮下接种建立癌性恶病质小鼠模型,将小鼠随机分为正常组、模型组、保元解毒汤组和甲羟孕酮组,连续给药21 d,记录小鼠摄食量、体质量及肿瘤体积;多维质谱"鸟枪"法脂质组学(multi-dimensional mass spectrometry-based shotgun lipidomics,MDMS-SL)技术检测肝脏脂质含量;透射电镜观察肝脏线粒体改变;酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测肝脏三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测肝脏线粒体呼吸链复合物泛醌氧化还原酶亚基B8(NADH:ubiquinone oxidoreductase subunit B8,NDUFB8)、琥珀酸脱氢酶复合物铁硫亚基B(succinate dehydrogenase complex iron sulfur subunit B,SDHB)、泛醇-细胞色素C还原酶核心蛋白 2(ubiquinol-cytochrome-c reductase complex core protein 2,UQCRC2)的mRNA表达水平;免疫印迹法检测肝脏线粒体呼吸链复合物NDUFB8蛋白表达水平.[结果]与模型组比较,保元解毒汤组小鼠摄食量、体质量增加,肿瘤增长缓慢(P<0.05).脂质组学结果显示,模型组肝脏脂质较正常组发生显著改变,保元解毒汤干预后可明显调节其中33种脂质分子(P<0.05).透射电镜结果显示,模型组线粒体形态扭曲,部分线粒体内容物降解、线粒体外膜破裂,线粒体嵴明显缩短、断裂,保元解毒汤组线粒体形态较模型组明显缓解,嵴状结构破坏减轻.ELISA结果显示,保元解毒汤组肝脏ATP含量较模型组明显增加(P<0.05).RT-qPCR结果显示,保元解毒汤干预后可明显升高线粒体呼吸链复合物NDUFB8、SDHB、UQCRC2的mRNA表达水平(P<0.05).免疫印迹显示,保元解毒汤干预可显著升高线粒体呼吸链复合物NDUFB8的蛋白表达水平(P<0.05).[结论]保元解毒汤能明显增加癌性恶病质小鼠体质量、摄食量,调节肝脏脂质代谢异常变化,恢复肝脏线粒体呼吸链复合物活性,改善线粒体呼吸功能和能量代谢.
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