和胃消瘤方调控胃癌小鼠肿瘤相关巨噬细胞极化及其作用机制研究
Study on the Regulation of Polarization of Tumor-associated Macrophages in Mice with Gastric Cancer by Hewei Xiaoliu For-mula and Its Mechanism
摘要[目的]研究和胃消瘤方抑制胃癌的有效性及其对肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAM)极化的影响,并探索其机制.[方法]建立HGC-27胃癌荷瘤小鼠模型,观察和胃消瘤方对小鼠移植瘤瘤体质量、体积及肿瘤组织TAM表型、Prospero相关同源异形盒蛋白1(prosperohomeobox 1,PROX1)/干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)蛋白表达的影响.采用流式细胞术检测和胃消瘤方干预后的胃癌细胞上清液对TAM表型的影响;酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)、免疫印迹法检测和胃消瘤方对胃癌细胞上清液IFN-γ、胃癌细胞PROX1/IFN-γ蛋白表达水平的影响;建立小干扰RNA(small interfering RNA,siR)-IFN-γ转染胃癌细胞-巨噬细胞共培养体系,检测和胃消瘤方干预后的TAM表型变化.[结果]和胃消瘤方可减少小鼠移植瘤体积、瘤体质量(P<0.05),提高肿瘤组织内M1型TAM比例、降低M2型TAM比例(P<0.05),降低肿瘤组织内PROX1蛋白表达、提高IFN-γ蛋白表达(P<0.01).经和胃消瘤方干预后的胃癌细胞上清液能够提高M1型TAM比例、降低M2型TAM比例(P<0.01).和胃消瘤方可提高胃癌上清液IFN-γ表达水平(P<0.05),降低胃癌细胞PROX1蛋白表达(P<0.05),提高IFN-γ蛋白表达(P<0.05).此外,siR-IFN-γ转染胃癌细胞后,和胃消瘤方干预后的M1型TAM比例低于siR-阴性对照(negative control,NC)+和胃消瘤方组(P<0.05).[结论]和胃消瘤方可抑制HGC-27胃癌生长,促进肿瘤微环境中TAM向M1表型极化,其机制可能与调控胃癌PROX1/IFN-γ信号通路,提高IFN-γ表达有关.
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