摘要[目的]探讨吴门骨密葆方治疗快速骨老化模型小鼠(senescence accelerated mouse prone 6,SAMP6)骨质疏松症(senile osteoporosis,SOP)的效应机制.[方法]以抗快速骨老化亚系小鼠(SAM-resistant1,SAMR1)为对照组,将SAMP6小鼠随机分为模型组(SAMP6)和中药低剂量组(SAMP6+吴门骨密葆方生药7.5 g·kg-1)、中药高剂量组(SAMP6+吴门骨密葆方生药15.0 g·kg-1),每组10只.对照组和模型组分别给予等体积的0.9%氯化钠溶液灌胃,中药两组给予对应水煎液灌胃,每天1次,连续12周.实验期间观察体质量变化;实验结束后采用苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察小鼠股骨病理改变;微计算机断层扫描(micro computed tomography,Micro-CT)观察小鼠股骨微结构及其参数;生化法检测小鼠血清钙(calcium,Ca)、磷(phosphorus,P)水平;酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测降钙素(calcitonin,CT)、Ⅰ型前胶原N端前肽(procollagen typeⅠ N-terminal propeptide,PⅠNP)、骨谷氨酸蛋白(bone γ-carboxyglutamic acid-containing protein,BGP)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,TRACP)、Ⅰ型前胶原C端前肽(procollagen type Ⅰ C-terminal propeptide,PⅠCP)、胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)、甲状旁腺激素(parathyroid hormone,PTH)水平;免疫组化(immunohistochemistry,IHC)染色检测Wnt信号-核因子-κB受体活化因子配体(ligand of receptor activator of nuclear factor-κB,RANKL)/破骨细胞抑制因子骨保护素(osteoprotegerin,OPG)轴的相关蛋白Wnt3a、磷酸化-b-连环素(phosphorylated-b-catenin,p-b-catenin)、OPG、核因子-κB受体活化因子(receptor activator of NF-κB,RANK)与其配体RANKL、分泌型蛋白Dickkopf-1(DKK1)和糖原合成酶激酶3b(glycogen synthase kinase 3b,GSK3b)的表达.[结果]与对照组比较,模型组骨组织皮质骨纹理、走向和骨细胞排列紊乱,且骨小梁结构松散,呈现骨质疏松状态;骨微结构参数骨密度、骨体积/组织体积比、骨小梁数量、骨小梁厚度显著下降(P<0.05),且骨小梁分离度显著升高(P<0.05);血清Ca、BGP、PⅠNP、CT和ALP水平明显减低(P<0.05),而P、TRACP、PⅠCP、IGF-1水平显著增高(P<0.05);Wnt3a表达显著下调(P<0.05),p-b-catenin、OPG、RANK、RANKL、DKK1和GSK3b表达均显著上调(P<0.05).与模型组比较,中药低、高剂量组可不同程度地改善股骨病理形态;增加骨小梁数量,并能减少骨小梁断裂,改善骨微结构相关参数(P<0.05);升高血清Ca、CT、BGP、PⅠNP和ALP的水平(P<0.05),且降低P、TRACP、PⅠCP、IGF-1水平(P<0.05),并促进PTH水平增高(P<0.05);同时能上调小鼠股骨中Wnt3a蛋白表达(P<0.05),下调p-b-catenin、OPG、RANK、RANKL、DKK1和GSK3b蛋白表达(P<0.05).[结论]吴门骨密葆方具有明显改善SAMP6小鼠骨质疏松的效用,其作用机制可能与调控Wnt/β-catenin和OPG/RANK/RANKL通路相关.