摘要[目的]探索能够对微量雷公藤甲素(triptolide,TP)进行快速检测和准确分析的新方法.[方法]以4'-甲基-2,2'-联吡啶-4-甲酸(4-carboxy-4'-methyl-2,2'-bipyridine,Me-bpy-COOH)和顺式-二氯双(2,2'-联吡啶)合钌(Ⅱ)(cis-bis(2,2'-bipyridine)dichlororuthenium(Ⅱ),cis-Ru(bpy)2CL2)为原料,合成三联吡啶钌单羧酸荧光试剂,即双(2,2'-联吡啶)(4-甲基-4'-羧基-2,2'-联吡啶)钌(Ⅱ)双六氟磷酸盐(bis(2,2'-bipyridyl)(4-methyl-4'-carboxy-2,2'-bipyridyl)ruthenium(Ⅱ)bishexafluorophosphate,Ru(bpy)2(bpy-COOH)2PF6).通过正交试验优化Ru(bpy)2(bpy-COOH)2PF6 与TP的柱前衍生反应条件,并对TP-三联吡啶钌荧光衍生物(triptolide-terpyridine ruthenium derivative,TTRD)的高效液相色谱-荧光检测(high performance liquid chromatography-fluorescence detection,HPLC-FLD)进行方法学评价.以市售昆仙胶囊为研究对象,采用新建的评价方法进行检测.[结果]经核磁共振氢谱(proton nuclear magnetic resonance,1H-NMR)和超高效液相色谱-质谱联用仪(ultra high performance liquid chromatography-mass spectrometry,UPLC-MS)检测,确定合成的共价结合的荧光衍生物为TTRD;柱前衍生反应优化后的最佳条件为Ru(bpy)2(bpy-COOH)2PF6与TP的投料比为4:1(mol:mol),反应时间2 h,反应温度45℃,该条件下Ru(bpy)2(bpy-COOH)2PF6能够充分修饰TP.同时建立了TP柱前衍生HPLC-FLD检测方法,该方法在50～1 200 μg·L-1内有良好的线性关系.以该方法检测昆仙胶囊中的TP含量,结果为78.78 μg·g-1,符合国家药品标准规定.[结论]TP柱前衍生HPLC-FLD检测方法具有良好的灵敏度、精确性和可靠性,可作为微量TP检测的一种新方法.