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水稻蜡质基因OsCER4的原核表达及多克隆抗体制备

Prokaryotic expression and polyclonal antibody preparation of wax gene OsCER4 in rice

摘要利用PCR方法扩增水稻(Oryza sativa L.)蜡质基因OsCER4的开放阅读框(Open reading frame,ORF),并克隆到原核表达载体pET-23d上,将表达载体OsCER4-pET转入大肠杆菌(Escherichia coli)B121(DE3)菌株,以1.2mmol/L的异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(Isopropyl β-D-thiogalactoside,IPTG)诱导表达融合蛋白,然后以融合蛋白作为抗原免疫家兔,制备多克隆抗体.SDS-PAGE电泳分析结果表明,成功诱导表达了分子量约为71.6kD的融合蛋白,而Western blot检测表明,免疫家兔的抗血清与水稻幼苗总蛋白杂交信号较好.0sCER4抗体的制备有助于研究OsCER4基因的表达特性.

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作者 周玲艳 [1] 秦华明 [2] 周海 [3] 杨家伟 [3] 庄楚雄 [3] 学术成果认领
作者单位 仲恺农业工程学院生命科学学院,广东广州510225/华南农业大学生命科学学院,广东广州510642 [1] 暨南大学理工学院,广东广州,510564 [2] 华南农业大学生命科学学院,广东广州,510642 [3]
分类号 Q511
栏目名称 研究报告
DOI 10.3969/j.issn.1674-5663.2012.01.004
发布时间 2012-06-02
基金项目
广东省自然科学基金
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