水稻蜡质基因OsCER4的原核表达及多克隆抗体制备
Prokaryotic expression and polyclonal antibody preparation of wax gene OsCER4 in rice
摘要利用PCR方法扩增水稻(Oryza sativa L.)蜡质基因OsCER4的开放阅读框(Open reading frame,ORF),并克隆到原核表达载体pET-23d上,将表达载体OsCER4-pET转入大肠杆菌(Escherichia coli)B121(DE3)菌株,以1.2mmol/L的异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(Isopropyl β-D-thiogalactoside,IPTG)诱导表达融合蛋白,然后以融合蛋白作为抗原免疫家兔,制备多克隆抗体.SDS-PAGE电泳分析结果表明,成功诱导表达了分子量约为71.6kD的融合蛋白,而Western blot检测表明,免疫家兔的抗血清与水稻幼苗总蛋白杂交信号较好.0sCER4抗体的制备有助于研究OsCER4基因的表达特性.
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