摘要目的:研究长链非编码 RNA(long non-coding RNA,LncRNA)GATA6反义 RNA1(GATA6 antisense RNA 1,GATA6-AS1)调控 GATA6 表达对胃癌5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)耐药细胞SGC7901/5-FU增殖、凋亡及转移的影响,并探讨可能的作用机制.方法:以亲本SGC7901细胞和SGC7901/5-FU细胞作为对照组,采用Lipofectamine 2000 将空载体 pcDNA3.1、重组载体 pcDNA3.1-GATA6-AS1、shNC 和 shGATA6-AS1 分别转入 SGC7901/5-FU 细胞,使 GATA6-AS1 过表达或沉默表达.采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞中GATA6-AS1和GATA6mRNA的表达情况.各组细胞经5-FU处理后,分别采用CCK-8法检测细胞增殖的能力,细胞划痕愈合实验检测细胞的迁移能力,Transwell实验检测细胞的侵袭能力,FCM法检测细胞的凋亡能力.随后采用蛋白质印迹法检测各组细胞中Bax、Bcl-2、Caspase 3和GATA6蛋白的表达水平,再用α-鹅膏菌素处理后的细胞用于检测GATA6 mRNA的稳定性;RNA pull-down实验检测GATA6-AS1与GATA6之间的相关性.最后用Balb/c裸鼠建立SGC7901细胞移植瘤模型,分组与体外实验分组相同;经5-FU治疗后,观察各组裸鼠的肿瘤生长情况并计算抑瘤率.HE染色后观察各组移植瘤组织病理学的变化情况,蛋白质印迹法检测各组裸鼠肿瘤组织中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)蛋白的表达情况.结果:经5-FU处理后,与亲本SGC7901细胞相比,SGC7901/5-FU细胞中GATA6-AS1和GATA6 mRNA的表达水平明显下调(P均＜0.05);细胞的增殖能力、迁移能力和侵袭能力均明显提高,细胞的凋亡能力明显降低(P均＜0.05);GATA6、Bax和Caspase 3蛋白的表达水平均明显下调而Bcl-2蛋白的表达水平明显升高(P均＜0.05).与SGC7901/5-FU-pcDNA组相比,GATA6-AS1过表达的SGC7901/5-FU细胞中相关指标与上述变化相反.与SGC7901/5-FU-shNC组相比,沉默GATA6-AS1表达的SGC7901/5-FU细胞中GATA6-AS1和GATA6 mRNA的表达水平明显下调(P均＜0.05);细胞的增殖能力、迁移能力和侵袭能力均明显提高,细胞的凋亡能力明显降低(P均＜0.05);GATA6、Bax和Caspase 3蛋白的表达水平均明显下调而Bcl-2蛋白的表达水平明显升高(P均＜0.05).GATA6-AS1可增强GATA6 mRNA的稳定性,GATA6-AS1正向调控GATA6的表达.体内实验检测结果显示,经5-FU治疗后,与亲本SGC7901细胞组相比,耐药SGC7901/5-FU细胞组小鼠的肿瘤体积、肿瘤组织中PCNA蛋白的表达水平显著增加(P均＜0.05);与SGC7901/5-FU-pcDNA组相比,SGC7901/5-FU-GATA6-AS1组小鼠的肿瘤体积、肿瘤组织中PCNA蛋白的表达水平显著降低(P＜0.05),肿瘤组织病理学观察发现GC发展程度较轻;与SGC7901/5-FU-shNC组相比,SGC7901/5-FU-shGATA6-AS1组小鼠的肿瘤体积、肿瘤组织中PCNA蛋白的表达水平显著升高(P＜0.05),GC发展程度严重.结论:GATA6-AS1过表达后可促进GATA6的表达,抑制GC细胞的生长,从而逆转SGC7901/5-FU细胞对5-FU的耐药性.