摘要目的:探讨黄精黄芪复方抑制肺癌进展的作用机制.方法:采用CCK-8法检测不同浓度黄精黄芪复方处理下人肺癌A549和H1299细胞的增 殖 抑 制 率 并 计 算 黄 精 黄 芪 复 方 的 半 抑 制 浓 度(half maximal inhibitory concentration,IC50);用携带Cre酶的腺病毒对C57BL/6小鼠(基因型:KRASG12D/+;TP53flox/flox)滴鼻1次,构建原发性肺癌小鼠模型,予以黄精黄芪饲料喂养以直接检测黄精黄芪复方在体内对肺癌组织的作用,采用免疫组织化学染色法检测小鼠肺组织的病理进展;生物信息学分析提示黄精黄芪复方通过爱帕琳肽(apelin)-过氧化物酶体增殖物激活受体 γ 共激活剂 1-alpha(peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1-alpha,PGC1α)-解偶联蛋白 1(mitochondrial brown fat uncoupling protein 1,UCP1)信号通路影响肺癌进展;采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测黄精黄芪复方对A549和H1299细胞中apelin-PGC1α-UCP1信号通路相关基因mRNA和蛋白的表达水平的影响;分别采用ATP检测试剂盒和流式细胞术检测黄精黄芪复方对A549和H1299细胞ATP总产量及线粒体活性氧(reactive oxygen species,ROS)生成的影响;采用siUCP1沉默UCP1表达,用Z160诱导UCP1过表达,并检测A549和H1299细胞ATP总产量及线粒体ROS的变化,以进一步验证黄精黄芪复方是否通过apelin-PGC1α-UCP1信号通路影响肺癌进展.结果:黄精黄芪复方可明显抑制A549和H1299细胞的增殖,IC50分别为10.66 mg/mL和9.66 mg/mL;在小鼠肺原位癌模型中,黄精黄芪复方可明显抑制肿瘤的生长,并下调apelin-PGC1α-UCP1信号通路,抑制促肺癌基因UCP1的表达;在A549和H1299细胞中黄精黄芪复方能显著抑制apelin、PGC1α和UCP1的表达(P＜0.05)、促进ATP合成(P＜0.000 1)和ROS产生并恢复线粒体氧化磷酸化,抑制有氧糖酵解(P＜0.01);沉默UCP1能增加A549和H1299细胞的ATP合成(P＜0.01)和线粒体ROS产生,并降低有氧糖酵解关键酶己糖激酶2(hexokinase 2,HK2)和肌肉丙酮酸激酶同工酶2(pyruvate kinase isozyme type M2,PKM2)的蛋白表达水平(P＜0.05);而增加UCP1表达能减少细胞内ATP合成(P＜0.01)及线粒体ROS的产生,并增加HK2和PKM2蛋白的表达水平(P＜0.05),用黄精黄芪复方处理细胞的同时予以Z160干预(PA+Z160)可著逆转黄精黄芪复方复方对肿瘤细胞ATP产生及有氧糖酵解的抑制作用(P＜0.05).结论:黄精黄芪复方通过下调apelin-PGC1α-UCP1信号通路,抑制线粒体解偶联,恢复线粒体氧化磷酸化,抑制有氧糖酵解,逆转Warburg效应,从而抑制肺癌进展.