人源化肿瘤-免疫微环境小鼠模型的建立

Establishment of a humanized tumor-immune microenvironment mouse model

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摘要目的:本研究旨在通过将人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)过继转移到NPSG(NOD-PrkdcscidIl2rgnull/Shjh)小鼠,并移植人源肿瘤组织,构建hPBMC-NPSG-PDX(patient-derived xenograft)模型,以模拟人体肿瘤微环境,研究肿瘤与免疫系统的相互作用.方法:将健康志愿者外周血PBMC过继转移到NPSG小鼠,构建hPBMC-NPSG模型.将非小细胞肺癌患者的手术切除肿瘤组织移植到Nude(BALB/c-nu)小鼠,建立Nude-PDX模型.将传至第3代的PDX肿瘤组织移植到hPBMC-NPSG小鼠,构建hPBMC-NPSG-PDX模型.通过监测小鼠体质量、采用流式细胞术分析免疫系统重建、检测T细胞功能、评估肿瘤生长情况以及免疫组织化学法分析肿瘤组织形态学特征和免疫细胞浸润,综合评价模型的有效性.结果:hPBMC-NPSG小鼠构建28 d后,人源hu-CD45+CD3+T细胞比例达97％.人CD8+T、CD4+T、CD56+自然杀伤和CD19+B细胞的比例分别为64％、24％、4.6％和1.0％.CD4+和CD8+细胞分泌多种细胞因子(IL-2、IFN-γ和TNF-α)以及表达细胞毒性分子(FasL、granzyme B 和 perforin).在 hPBMC-NPSG-PDX 小鼠中,肿瘤生长初期迅速,随后趋于稳定.免疫组织化学染色结果显示,肿瘤形态学特征典型,在免疫细胞浸润的区域伴随有肿瘤细胞的凋亡.结论:本研究成功构建了 hPBMC-NPSG-PDX模型,该模型可有效模拟人体肿瘤微环境,为研究肿瘤免疫学提供了理想的平台.