摘要目的:探讨叶酸受体α(folate receptor alpha,FOLR1)在肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)中的表达特征及其在肝脏疾病中的潜在作用,并构建HSCs特异性敲除FOLR1基因小鼠模型.方法:本研究基于单细胞转录组与临床公共数据库,分析了FOLR1在肝癌组织及HSCs中的表达情况.通过CRISPR-Cas9基因编辑技术构建的Lrat-Cre以及FOLR1 flox小鼠,用于构建HSCs特异性FOLR1基因敲除小鼠,并通过PCR法检测评估FOLR1基因敲除效率和模型特异性.采用二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,DEN)联合四氯化碳(CCl4)诱导未敲除FOLR1基因的FOLR1fl/fl小鼠(对照组)和敲除FOLR1基因的FOLR1ΔHSC小鼠构建自发小鼠HCC模型,随后通过实时荧光定量PCR、酶联免疫吸附(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法及荧光免疫组织化学法检测各组小鼠中FOLR1 mRNA和蛋白的表达水平.结果:FOLR1在激活的HSCs中显著高表达,且与HCC患者不良预后相关.成功构建获得HSCs特异性FOLR1基因敲除小鼠FOLR1ΔHSC,经PCR及测序验证其敲除效率良好.实时荧光定量PCR检测结果提示,相较于FOLR1fl/fl小鼠,DEN联合CCl4诱发肝癌的FOLR1ΔHSC小鼠肝组织中FOLR1 mRNA的表达水平下调了 60.31%(P＜0.05),ELISA法 检测结果显示血清中FOLR1蛋白浓度降低了38.32%(P＜0.01),免疫荧光染色法检测结果显示 肝组织中FOLR1蛋白阳性染色面积减少了67.96%(P＜0.01).结论:成功构建获得HSCs特异性敲除FOLR1基因的小鼠,为进一步探索FOLR1在HSCs中可能的作用机制提供了独特的动物模型平台.