换一批
换一批摘要目的 探讨癌基因EMS1表达产物皮层蛋白(cortactin)与结肠癌细胞内吞运动的关系.方法 采用共聚焦显微镜检测人结肠癌细胞株HT29细胞内cortactin与内吞过程功能蛋白Rab5及Rab11的分布情况,以及cortactin和组成性内吞标记转铁蛋白(Tfn)的关系.采用病毒转染的方法 .将外源性全长cortactin及其突变体转入结肠癌细胞内,观察过表达皮层蛋白及其变异体对细胞内吞活动的影响.进一步采用Western blot和免疫荧光分析方法 检测cortactin磷酸化与Tfn内吞在时间和剂量上的关系.结果 cortactin与Rab5/11及Tfn在HT29细胞内共定位.当HT29细胞过表达皮层蛋白氨基端或羧基端缺失的突变体时,细胞的内吞活动受到削弱,而表达全长皮层蛋白或载体的对照组未受明显影响.同时发现cortactin的磷酸化与Tfn内吞呈时间和剂量依赖关系.结论 cortactin在结肠癌细胞HT29的内吞活动中发挥作用,其功能的发挥可能依赖其氨基端和羧基端结构区域.在内吞过程中,皮层蛋白发生磷酸化.
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分类号
R735.3+5
栏目名称
基础研究
DOI
10.3971/j.issn.1000-8578.2009.03.002
发布时间
2009-05-12
基金项目
国家自然科学基金
江苏省自然科学基金
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