换一批精胺/精眯N1-乙酰基转移酶重组蛋白的原核表达及其抗体制备
Prokaryotic Expression and Antibody Preparation of Human Spermine/Spermidine N1-acetyltransferase
摘要目的 探讨精胺/精眯N1乙酰基转移酶(SSAT)的原核表达及抗SSAT多克隆抗体的制备.方法 RT-PCR法从人肺癌细胞总RNA中克隆SSAT cDNA后,构建SSAT原核表达质粒pET15b/SSAT并转化BL21(DE3)大肠杆茵细胞.SSAT重组蛋白经IPTG诱导表达后,利用PAGE凝胶纯化和Ni-NTA亲和层析纯化.用凝胶纯化的SSAT重组蛋白免疫家兔以制备抗SSAT多克隆抗体,所得抗体的特异性及效价用Western blot和ELISA技术检测.结果 SSAT重组蛋白可在大肠杆茵中诱导性高表达,用此蛋白免疫动物所得的SSAT抗体的效价以及特异性均较高.结论 建立了SSAT原核表达系统并成功制备出SSAT多克隆抗体.
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DOI
10.3971/j.issn.1000-8578.2009.06.007
发布时间
2009-07-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（30772590）
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