肝癌干细胞表面标志物CK19在化学诱癌过程中的差异表达

Differential Expression of Stem Cell Marker CK19 in Process of Chemical Carcinogenesis of Liver Cancer

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摘要目的检测CK19基因在化学诱发C57BL/6J小鼠肝癌过程中各阶段的表达差异.方法对50只C57BL/6J雄性小鼠通过化学法诱发肝癌,以50只正常C57BL/6J雄性小鼠为对照组.观察诱癌小鼠的生长状况,每4周处死一批小鼠获取组织标本进行病理学、荧光实时定量PCR(FQ-RT-PCR)法、Western blot等检测CK19基因及蛋白表达差异.结果在化学诱癌第16周后处死的小鼠出现明显的灰白色小结节,直径为2 mm大小,第20周时肝癌结节直径在5～25 mm之间,呈多发性.早期病理改变主要是肝细胞排列结构轻度紊乱,细胞轻度的异型增生.病理切片显示为中、高分化的肝癌细胞,可见瘤巨细胞和病理性核分裂,间质肝纤维组织增生,提示有肝硬化改变；RT-PCR,Western blot结果显示,实验组小鼠在化学诱癌第16周开始CK19-mRNA表达升高,第20周时明显增强；荧光定量结果显示,CK19 mRNA在化学诱癌第4、8、12、16及20周的小鼠肝癌组织中的表达水平分别为(2.133±0.470)、(2.395±0.472)、(2.767±0.729)、(3.217±0.627)和(14.095±5.812),与同期对照组比较差异具有统计学意义(P＜0.05).结论肝癌干细胞标志物CK19参与了肝癌的发生发展,其表达量随诱癌时间的延长而逐渐增加,但其对肝癌发生发展的确切调控机制有待深入研究.