换一批
换一批pEGFP-C1-STAT3真核表达载体的构建及其在SGC7901细胞株中对Snail表达的影响
Construction of pEGFP-C1-STAT3 Recombinant Eukaryotic Expression Vector and Its Effect on Expression of Snail in SGC7901 Cell Line
摘要目的 研究信号转导与转录激活因子3 (STAT3)基因转染人胃癌细胞株SGC7901后,对锌指转录因子Snail1 (Snail)及切除修复交叉互补基因1(excision repair cross complementation group 1,ERCC1)表达的影响.方法 利用基因重组技术构建重组pEGFP-C1-STAT3真核表达载体;脂质体介导转染技术转染胃癌细胞株SGC7901,荧光显微镜、Western blot检测转染后SGC7901细胞株中STAT3、pSTAT3、Snail及ERCC1的表达,流式细胞仪检测转染后顺铂处理下细胞凋亡率.结果 重组质粒经HindⅢ、SacⅡ双酶切测序与STAT3基因序列一致;利用脂质体介导将pEGFP-C1-STAT3重组质粒转染SGC7901细胞株,获得了STAT3基因表达,Western blot检测pSTAT3、Snail、ERCC1表达增高,具有统计学意义,流式细胞术分析显示转染重组质粒pEGFP-C1-STAT3后,细胞在顺铂作用下的早期凋亡率减低.结论 成功构建STAT3重组质粒并转入中分化胃腺癌细胞株SGC7901后,细胞Snail及ERCC1显著增高,细胞对顺铂敏感度下降.
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关键词
信号转导与转录激活因子3锌指转录因子切除修复交叉互补基因1胃癌载体构建Signal transducer and activator of transcription factor (STAT3)Zinc finger transcript factor SnailExcision repair cross complementation group 1 (ERCC1)Gastric cancerVector construction
主题词
细胞(Cells)基因(Genes)转染(Transfection)胃肿瘤(Stomach Neoplasms)转录激活因子3(Activating Transcription Factor 3)
分类号
R735.2
栏目名称
基础研究
DOI
10.3971/j.issn.1000-8578.2013.08.005
发布时间
2013-10-10
基金项目
江苏省消化系统疾病临床医学中心基金资助项目
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