换一批
换一批三阴性乳腺癌MDA-MB-231顺铂耐药细胞株的建立及鉴定
Establishment and Appraisal of DDP Resistant Variant of Triple Negative Breast Cancer Cell Line MDA-MB-231
摘要目的 建立人三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231顺铂(DDP)耐药细胞株,并对其耐药机制进行初步分析.方法 采用逐步增加顺铂浓度、间歇诱导的方法,建立人三阴性乳腺癌MDA-MB-231/DDP体外耐药细胞模型;MTT法检测MDA-MB-231/DDP的耐药特性;高效液相色谱法检测耐药细胞内DDP药物浓度的改变;实时荧光定量PCR法分析两种细胞耐药相关基因MDR1、BCRP、MMP7及GST-π表达差异.结果 MTT显示MDA-MB-231/DDP的顺铂、5-氟尿嘧啶及环磷酰胺的耐药指数分别为9.80、4.43及2.21;高效液相检测显示2种细胞分别与6μg/ml的DDP接触24 h后,MDA-MB-231细胞内DDP的浓度为(47.10±2.37)ng/(5×104) cells,而MDA-MB-231/DDP细胞则为(6.30±1.64)ng/(5×104) cells (P＜0.01);MDA-MB-231/DDP细胞中MDR1、BCRP、MMP7及GST-π基因mRNA的表达量分别是亲本细胞的15.39、13.73、22.52及44.90倍(P＜0.01).结论 逐步增加浓度、间歇诱导的方法建立了稳定、耐药性较高的MDA-MB-231/DDP细胞株,其耐药机制可能与ABC转运蛋白表达增加等多种机制相关.
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