换一批
换一批基因干预后胶质瘤A172细胞中HIF-1α和VEGF的表达
Expression of HIF-1α and VEGF in Glioma A172 Cells After Gene Intervention
摘要目的 观察体外基因干预后HIF-1α和VEGF表达的变化,从而探讨HIF-1α在胶质瘤血管新生调控中所起的作用.方法 CoCl2化学缺氧法模拟肿瘤缺氧环境,反转录聚合酶链式反应(qPCR)、免疫荧光法、Western blot法和ELISA双抗体夹心法比较基因干预HIF-1α前后,胶质瘤A172细胞相关mRNA和蛋白表达量变化.结果 缺氧环境下HIF-1α mRNA表达未见明显变化,VEGFmRNA表达明显增多;缺氧培养8、16、24 h,HIF-1α及VEGF蛋白表达依次增多.基因干预成功后缺氧培育24 h,HIF-1α及VEGF蛋白表达明显减少,与未转染组比较,转染抑制率分别是86.3％和78.9％,VEGFmRNA表达抑制率是81.5％.结论 siRNA干预抑制HIF-1α表达后VEGF表达明显减少.缺氧促使A172细胞HIF-1α在蛋白水平表达升高,HIF-1α通过转录激活VEGF促进胶质瘤缺氧状态下的血管新生.
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