UBE2T对乳腺癌细胞增殖、凋亡及上皮-间质转化的影响
Effects of UBE2T on Proliferation,Apoptosis,and Epithelial-Mesenchymal Transition of Breast Cancer Cells
摘要目的 探究泛素结合酶E2T(UBE2T)在乳腺癌中的表达和对预后的影响及其可能的作用机制.方法 采用肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库分析UBE2T在乳腺癌组织中的表达情况,Kaplan-Meier生存曲线分析UBE2T高低表达对无病生存期(DFS)和总生存期(OS)的影响.实时定量PCR和Western blot验证UBE2T敲降和过表达效率,分析其对肿瘤细胞生物学行为的影响,Western blot研究UBE2T对细胞上皮-间质转化(EMT)的作用.构建异种移植瘤模型,验证敲降UBE2T对乳腺癌细胞在体内生长的影响.结果 UBE2T在乳腺癌组织和癌旁组织的表达量差异具有统计学意义(P<0.001),在远处转移或分期较晚的乳腺癌患者中表达量较高(均P<0.05),且UBE2T高表达组的DFS和OS降低(均P<0.05).UBE2T在MCF-7、MDA-MB-231细胞中高表达,在MDA-MB-361细胞中低表达(均P<0.01).敲降UBE2T后肿瘤细胞增殖能力显著下降,而上调UBE2T表达后细胞增殖能力增强(均P<0.05);沉默组MCF-7、MDA-MB-231细胞凋亡率均较shNC组显著升高,过表达组MAD-MB-361细胞凋亡率下降(均P<0.001);敲降组细胞迁移率较shNC组降低,而过表达组细胞迁移率显著增加(均P<0.01).此外,敲降组细胞迁移数和侵袭数均低于shNC组,过表达组细胞迁移数和侵袭数均高于对照组(均P<0.01).下调UBE2T可以降低N-cadherin、Snail和Vim-entin的表达(均P<0.05),升高E-cadherin的表达,而上调UBE2T表达则相反(均P<0.01);但TIMER数据库分析结果提示,UBE2T表达与E-cadherin(P<0.001)、N-cadhe-rin(P=0.013)、Snail(P<0.001)正相关,与Vimentin负相关(P<0.001).体内实验表明下调UBE2T可以减缓移植瘤的生长速度.结论 UBE2T在乳腺癌组织中高表达并影响患者预后,UBE2T可以促进乳腺癌细胞的增殖,并抑制凋亡,同时通过改变EMT相关蛋白的表达,增强肿瘤细胞迁移和侵袭的能力.
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