换一批SerpinA5调控Fn/Integrin-β1信号通路抑制食管鳞癌恶性生物学行为
SerpinA5 Inhibits Malignant Biological Behavior of Esophageal Squamous Cell Carcinoma by Regulating Fn/Integrin-β1 Signaling Pathway
摘要目的 探讨SerpinA5对食管鳞癌(ESCC)细胞恶性生物学行为的影响及其分子机制.方法 通过TIMER2.0数据库分析SerpinA5基因在不同肿瘤和相邻正常组织之间的表达水平.Western blot检测SerpinA5在ESCC细胞系和食管上皮细胞中的表达情况.利用慢病毒构建SerpinA5过表达KYSE150细胞稳转株,Western blot方法检测过表达效率.采用CCK8、平板克隆实验、流式细胞术、创面愈合实验、Transwell侵袭实验检测过表达SerpinA5对食管鳞癌细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭能力的影响.构建过表达SerpinA5的裸鼠皮下移植瘤模型.观察肿瘤生长,测量瘤体的体积和质量.IHC法检测裸鼠皮下移植瘤中细胞增殖水平.采用免疫共沉淀(Co-IP)方法明确SerpinA5与Fn之间的相互作用.Western blot方法检测移植瘤中Fn/Integrin-β1信号通路相关蛋白(Fn、Integrin-β1、FAK和p-FAK)的表达水平变化.结果 SerpinA5在ESCC组织及细胞系中均为低表达水平.在ESCC细胞中过表达SerpinA5后,可显著抑制细胞的增殖、迁移及侵袭,促进其凋亡.SerpinA5过表达组的瘤体体积和质量均小于阴性对照组.IHC结果显示SerpinA5过表达可显著抑制瘤体中ESCC细胞增殖.Co-IP证实SerpinA5与Fn存在相互作用.过表达SerpinA5后裸鼠皮下移植瘤内ESCC细胞中Fn/Integrin-β1信号通路相关蛋白Fn、Integrin-β1、p-FAK表达水平显著降低.结论 Ser-pin A5可能通过调控Fn/Integrin-β1信号通路抑制食管鳞癌细胞的增殖、迁移、侵袭,并促进其凋亡.
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