换一批
换一批SGC-7901/DDP 胃癌细胞中 MDR1 miRNA 干扰载体构建及靶点筛选
Construction of Interfering Vectors for MDR1 MiRNA in SGC-7901/DDP Gastric Cancer Cell and Screening for Target Spots
摘要[目的]筛选胃癌细胞多药耐药基因1(MDR1)的有效RNA干扰靶点,并进行药物敏感度验证.[方法]设计并合成3条干扰靶点Oligo序列,连接入线性化的pcDNA6.2GW/EmGFP-miR载体中,瞬时转染SGC-7901/DDP胃癌细胞,通过qPCR相对定量法筛选出最佳干扰序列,将最佳干扰质粒转染细胞后,采用CCK-8试剂盒进行药物敏感度检测.[结果]通过qPCR筛选出相比阴性对照组干扰效果最佳的RNA干扰(RNAi)序列,MDR1的mRNA表达水平抑制了25％±1％.MDR1经RNA干扰后,药物敏感度实验表明耐药细胞株对顺铂的敏感度增强,IC50值相比空白对照组和阴性对照组分别下降0.4μg/ml、0.5μgml.[结论]成功筛选出一个MDR1的RNA干扰靶点,MDR1经RNA有效干扰后,耐药细胞株对顺铂的敏感性增强.
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