SEL1L3通过对P53信号通路的影响促进结直肠癌细胞增殖

SEL1L3 Enhances Proliferation of Colorectal Cancer Cells through P53 Signal Pathway

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摘要[目的]探讨SEL1L3对结直肠癌细胞增殖的影响及其分子机制.[方法]分析TCGA数据库中结直肠癌样本SEL1L3表达水平,免疫组织化学染色检测结肠癌组织中SEL1L3的表达水平,Western blot及qPCR检测结肠上皮细胞及结肠癌细胞中SEL1L3表达水平.携带GFP的SEL1L3特异性敲除慢病毒感染RKO细胞.Western blot及qPCR验证SEL1L3敲除效率;荧光显微镜、MTT及平板克隆检测细胞增殖能力,Annexin V检测细胞凋亡;细胞凋亡信号通路芯片检测SEL1L3敲除后相关基因的表达,并通过Western blot进行验证.CDX模型检测SEL1L3敲除后RKO细胞在裸鼠体内成瘤能力.[结果]TCGA数据库分析结果显示SEL1L3在结直肠癌中表达显著高于正常组织.免疫组织化学染色结果表明,SEL1L3在结肠组织中表达显著高于正常组织(6.580±1.103 vs 1.390±0.263,P＜0.01),结肠癌细胞中SEL1L3的表达也显著高于正常结肠上皮细胞;细胞增殖实验结果表明,SEL1L3敲除后,细胞增殖能力显著降低(P＜0.01).Annexin V检测结果显示,SEL1L3敲除后细胞凋亡明显增多(8.54％±0.41％vs 4.55％±0.27％,P＜0.01).裸鼠CDX模型结果则表明,SEL1L3能够促进RKO细胞在裸鼠体内的生长[(0.98±0.34)g vs(0.30±0.18)g,P＜0.01].细胞凋亡信号通路芯片及Western blot结果显示,SEL1L3表达敲除后,Caspase3(0.450±0.079 vs 1.160±0.115,P＜0.01)及 P53(0.290±0.018 vs 0.820±0.065,P＜0.01)表达显著上调,而 XIAP 表达则显著下调(1.170±0.071 vs 0.330±0.034,P＜0.01).[结论]SEL1L3 通过上调XIAP表达和抑制P53及Caspase3信号通路,从而促进了结直肠癌的增殖.