基于FOXO3a-ACSL4通路探讨环状RNA CRIM1对非小细胞肺癌细胞生物学行为的影响
Effect of CircularRNA CRIM1 on Biological Behavior of Non-Small Cell Lung Cancer Cell and Its Relation with FOXO3a-ASCL4 Pathway
摘要[目的]探讨环状RNA(circular RNA,circRNA)CRIM 1通过调控叉头盒蛋白O3a(forkhead box O3a,FOXO3a)长链脂酰辅酶A合成酶4(Acyl-CoA synthetase long-chain family member 4 pathway,ACSL4)通路影响非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞生物学行为.[方法]实时荧光定量聚合酶链反应检测正常肺上皮细胞BEAS-2B和NSCLC细胞(16HBE、H460、HCC827、A549)circRNA CRIM1、FOXO3a和ACSL4 mRNA表达水平;并选取cirRNA CRIMI表达变化最明显的HCC827细胞用于后续研究.实验分为Control组、si-NC组、si-circRNA CRIM1组、si-circRNA CRIM1+pc-NC组和si-circRNA CRIM1+pc-FOXO3a组.检测细胞增殖、细胞凋亡、细胞迁移、侵袭、circRNA CRIM1、FOXO3a和ACSL4 mRNA表达水平、FOXO3a、上皮钙黏蛋白(epithelial cadherin,E-cad-herin)、ACSL4、神经钙黏蛋白(neural cadherin,N-cadherin)、半胱氨酸蛋白酶3(cysteine proteinase 3,Cleaved cas-pase-3)、波形蛋白中间丝蛋白(vimentin intermediate filament protein,Vimentin)、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)和基质金属肽酶2(matrix metallopeptidase 2,MMP-2)蛋白表达水平.[结果]NSCLC组织和细胞中circRNACRIM1、FOXO3a和ACSL4 mRNA表达水平升高(P均<0.05).与Control和si-NC组比较,si-circRNA CRIM1组HCC827细胞OD490(24h、48h)和细胞增殖率、细胞划痕愈合率和侵袭细胞数量、circRNA CRIM1、FOXO3a和ACSL4 mRNA表达水平、N-cadherin、Vimentin、MMP-2、PCNA、FOXO3a和ACSL4蛋白表达水平降低,细胞凋亡率、E-cadherin和Cleaved caspase-3蛋白表达水平升高(P均<0.05).过表达FOXO3a可减弱低表达circRNA CRIM1对HCC827细胞生物学行为的抑制作用(P<0.05).[结论]低表达circRNA CRIM1可抑制HCC827细胞恶性生物学行为,可能与抑制FOXO3a-ACSL4通路有关.
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