高效治疗性抗体CHO细胞株的构建方法及其评价

Construction and evaluation of Chinese hamster ovary cell lines with a high therapeutic antibody

二维码有效期 120s

摘要目的采用一种高效的中国仓鼠卵巢细胞(CHO)细胞株构建方法获得稳定高表达治疗性重组蛋白的CHO细胞株.方法利用自主研发载体构建含目的基因的真核表达质粒,经电击转染转入CHO细胞中,经抗性压力筛选后使用细胞池至单克隆的一步筛选策略,配合一种新型的细胞成像系统,高效、快速地筛选出高表达单克隆株.结果成功构建多株稳定的高表达单克隆细胞株,其产量最高可至5.2 g·L-1;实验通过毛细管等电聚焦电泳法等进一步验证了细胞株产物关键质量特性,等电点均为9.2,所得抗体等电点较好.结论相比传统的构建方法需6～8个月,本研究筛选得到的高表达单克隆细胞株周期缩短了2个月.

作者刘治影 ^[1] 罗顺 ^[2] 吕芊锐 ^[3] 学术成果认领

作者单位安徽中医药大学药学院,合肥 230012;南通市海门长三角药物高等研究院,江苏南通 226133 ^[1] 南通市海门长三角药物高等研究院,江苏南通 226133;澳斯康生物(南通)股份有限公司,江苏南通 221600 ^[2] 澳斯康生物(南通)股份有限公司,江苏南通 221600 ^[3]

关键词中国仓鼠卵巢细胞细胞株构建高效筛选策略

分类号 R392

栏目名称 研究论文

DOI 10.7539/j.issn.1672-2981.2023.03.012

发布时间 2023-05-04