记忆型双特异性CAR-T细胞的工艺优化研究

Optimization of the process of memory dual specificity CAR-T cells

二维码有效期 120s

摘要目的研究能够显著降低CAR-T细胞的体外分化程度、维持记忆型CAR-T(CAR-Tm)细胞高浓度稳态的新工艺路径,提升和延长CAR-T细胞的肿瘤杀伤效果.方法采用流式细胞分析(FACS)技术,对原工艺采用CD3/CD28磁珠分选CD3+T细胞,在体外培养过程中不断补充IL-2细胞因子,和新工艺利用CD4/CD8磁珠分选出CD4+和CD8+T细胞并用耦联人源化抗体纳米粒(TransAct)活化,在体外培养过程中添加IL-7和IL-15培养所得T细胞分别进行CAR-Tm细胞亚群分析,并通过对比不同TransAct用量和培养时间获得最优制备工艺.结果新工艺得到的低分化记忆型CAR-T(CAR-Tscm+CAR-Tcm亚群)细胞占总T细胞和CAR-T细胞的比例显著高于原工艺(P＜0.05),TransAct的最佳用量为20％,细胞体外最佳培养时间为12 d.结论联用IL-7细胞因子、IL-15细胞因子、TransAct有利于维持靶向CD19/CD37双特异性低分化CAR-Tm细胞高位数量和维持时间,提高持久性,为其后续临床研究及产业化奠定了基础.

作者邹婷 ^[1] 马岩松 ^[2] 陈泽建 ^[3] 李长林 ^[4] 王蓉蓉 ^[5] 唐颖鑫 ^[3] 周文婷 ^[3] 陈德玉 ^[3] 周芳 ^[3] 向双林 ^[6] 学术成果认领

作者单位湖南师范大学生命科学学院,长沙 410081;湖南省药品监督管理局,长沙 410013 ^[1] 国家药品监督管理局食品药品审核查验中心,北京 100044 ^[2] 湖南远泰生物技术有限公司,长沙 410221 ^[3] 湖南省药品监督管理局,长沙 410013 ^[4] 湖南省药品检验检测研究院,长沙 410001;细胞治疗产品关键质量属性研究湖南省重点实验室,长沙 410001 ^[5] 湖南师范大学生命科学学院,长沙 410081;湖南远泰生物技术有限公司,长沙 410221 ^[6]

关键词 CAR-Tm细胞白细胞介素-7 白细胞介素-15 耦联人源化抗体纳米粒 memory CAR-T cell IL-7 IL-15 TransAct

分类号 R730.51

栏目名称 研究论文

DOI 10.7539/j.issn.1672-2981.2024.05.022

发布时间 2024-06-12

基金项目

湖南省科药联合基金项目