换一批基于酰胺甲基化策略的GluA2内吞阻滞剂环肽的合成及评价
Synthesis and evaluation of cyclopeptide,a GluA2 endocytosis blocker based on amide methylation strategy
摘要目的 在GluA2-3Y结构基础上通过环化和N-甲基化策略设计甲基化环肽,提高化合物与靶标的亲和力、神经保护活性及稳定性.方法 基于Fmoc固相合成法合成目标多肽,经RP-HPLC对多肽进行分析和纯化.采用表面等离子共振技术测试多肽与BRAG2蛋白的亲和力.通过CCK8法检测多肽对HT22细胞的毒性.构建氧糖剥夺(OGD)模型评价多肽的体外神经保护活性.通过HPLC检测多肽的血浆稳定性.结果 基于Fmoc固相合成法共设计合成14条多肽,经RP-HPLC分析纯度均在90％以上.表面等离子共振结果显示:环肽c10c-Y-5表现出与对照药Ac-3Y相近的亲和力,解离常数KD为0.68 μmol·L-1,与BRAG2蛋白有较强的亲和力.CCK8法测试多肽的毒性结果显示:10 μmol·L-1多肽在HT22细胞上基本没有毒性.环肽在OGD模型上对HT22细胞的神经保护活性结果显示:与模型组相比,环肽c10c-Y-2 在 1 μmol·L-1 和 10 μmol·L-1 下有神经保护活性(P＜0.05);环肽 c10c-Y-5 在 3个浓度下有神经保护活性(P＜0.05);环肽c10c-Y5G6在10 μmol·L-1下有神经保护活性(P＜0.01).环肽的血浆稳定性实验结果显示:c10c-Y-2和c10c-Y-5经环化和N-甲基化修饰后,与线性肽相比稳定性有大幅度提高.结论 本研究应用SPR技术和多肽在OGD模型上对HT22细胞的神经保护活性评价手段,筛选出了具有潜在神经保护活性且增强了血浆稳定性的环肽c10c-Y-2和c10c-Y-5,可为多肽药物的修饰改造提供思路和依据.
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关键词
N-甲基化修饰环化HT22细胞神经保护血浆稳定性N-methylation modificationcyclizationHT22 cellneuroprotectionplasma stability
分类号
R914.2（药物基础科学）
栏目名称
DOI
10.7539/j.issn.1672-2981.2024.08.004
发布时间
2024-09-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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