摘要目的 研究瑞舒伐他汀(RSV)对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的血管内皮细胞焦亡的影响及机制.方法 体外培养人脐静脉内皮细胞,随机分为Control组、TNF-α组、TNF-α+2.5 μmol/L RSV组、TNF-α+5 μmol/L RSV组 和TNF-α+10 μmol/L RSV组.除Control组外,其余各组加入TNF-α(40 ng/mL)处理细胞 12 h;RSV各组分别加入 2.5、5、10 μmol/L RSV孵育 1 h后加入TNF-α诱导.Hoechst 33342/碘化丙啶(PI)荧光双染和乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒评价细胞损伤;免疫荧光法检测半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-1(caspase-1)剪切体cleaved caspase-1 定位;Western blot法考察caspase-1 前体pro-caspase-1、cleaved caspase-1、焦孔素D(GSDMD)、GSDMD蛋白N端片段(GSDMD-N)、沉默信息调节因子 1(SIRT1)、乙酰化核因子κB(Ac-NF-κB)p65 的蛋白水平;ELISA法分析白细胞介素(IL)-1β、IL-18 分泌;细胞热转移分析(CETSA)检测RSV对SIRT1蛋白热力学稳定性的影响.进一步采用SIRT1 特异性抑制剂EX527 初步探讨RSV对TNF-α诱导焦亡的作用机制.结果 RSV能够降低TNF-α诱导的血管内皮细胞PI阳性细胞百分比(P＜0.01)和LDH活性(P＜0.05).Cleaved caspase-1 主要定位在胞质中;与Control组比较,TNF-α组相对荧光强度强(P＜0.05);与TNF-α组比较,RSV各组相对荧光强度弱(P＜0.05).与Control组比较,TNF-α组cleaved caspase-1、GSDMD-N、Ac-NF-κB p65表达上调(P＜0.01);与TNF-α组比较,RSV各组cleaved caspase-1、GSDMD-N、Ac-NF-κB p65水平显著下调(P＜0.05).RSV能够降低TNF-α诱导的IL-1β和IL-18 分泌(P＜0.05),并上调血管内皮细胞SIRT1 的表达(P＜0.01).CETSA结果表明RSV能够明显延缓SIRT1 的热变性,EX527 显著减弱RSV对TNF-α诱导IL-1β、IL-18 分泌和Ac-NF-κB p65水平的抑制作用(P＜0.01).结论 RSV可抑制TNF-α诱导的血管内皮细胞焦亡,其机制可能与调控SIRT1去乙酰化NF-κB有关.