换一批
换一批利用CRISPR/Cas9双质粒系统构建Nissle 1917ΔcheZ基因缺失株
Construction of Nissle 1917Δ cheZmutant Strain Using CRISPR/Cas9 Dual Plasmid System
摘要为研究趋化性基因cheZ对大肠杆菌益生菌Nissle 1917的影响,研究以敲除大肠杆菌Nissle 1917的cheZ基因为目的.首先,利用诺唯赞ClonExpress?MultiS一步克隆试剂盒构建pTargetTΔcheZ重组质粒,随后将pTargetTΔcheZ重组质粒电转入含pCas质粒的Nissle 1917感受态中,以实现对大肠杆菌益生菌Nissle 1917染色体中cheZ基因进行靶向敲除,经PCR鉴定和基因测序双重证实,Nissle 1917基因组中的cheZ基因已敲除.最后,经IPTG诱导和高温培养,消除缺失株中的pTargetTΔcheZ和pCas 2个质粒,最终获得趋化性基因cheZ缺失株Nissle 1917ΔcheZ.本试验为验证cheZ基因在益生菌Nissle1917中的生物活性及其扮演的基因功能的后续相关研究打下了前期基础.
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分类号
Q812
栏目名称
食品·生命科学
DOI
10.3969/j.issn.1009-8445.2023.02.005
发布时间
2023-04-13
基金项目
国家自然科学基金
广东省基础与应用基础联合基金项目
全国大学生平台创新和创业培训计划项目
广东省大学生创新创业训练计划项目
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