芪归合剂对体外培养的大鼠成骨细胞的影响

The Effects of Astragalus and Angelica Mixture on Cultured Rat Osteoblasts in vitro

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摘要[目的]通过血清药理学方法观察黄芪当归合剂(芪归合剂)对体外培养的大鼠成骨细胞生物学特性的影响.[方法]制备芪归合剂含药血清,以放射免疫法和免疫放射法检测其胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)、胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)、Ⅰ型前胶原氨基端伸展肽(PINP)和骨钙素(OC)水平.分离、培养乳鼠颅骨成骨细胞,通过形态学观察、HE染色、碱性磷酸酶染色(ALP染色)、茜素红S法、V-G法胶原染色进行培养成骨细胞的鉴定,以四唑盐比色法(MTT法)测定含药血清对成骨细胞增殖功能的影响;以放射免疫法测定培养上清液PINP、OC和IGF-Ⅰ浓度;用矿化结节计数法观察含药血清对成骨细胞矿化功能的影响.[结果]含药血清IGF-Ⅰ、IGFBP-3、PINP和OC水平与对照血清相比,差别无统计学意义(P＞0.05).含药血清和对照血清均可促进成骨细胞增殖,且呈浓度依赖性,但200 mL/L、300 mL/L含药血清促进成骨细胞增殖的能力高于对照血清组(分别P＜0.01和P＜0.05);含药血清组培养上清液PINP[(4.9±1.6)μg/L]、OC[(36.7±3.8)μg/L和IGF-Ⅰ[(1 677±67)μg/L]含量高于对照血清组[分别(2.8±0.5)μg/L、(27.8±7.2)μg/L、(1 284±34)μg/L](分别P＜0.05,P＜0.05和P＜0.01);以含药血清培养的成骨细胞形成的矿化结节数(25.8±7.8)多于对照血清组(13.3±6.2)(P＜0.05).[结论]芪归合剂含药血清能直接促进体外培养的大鼠成骨细胞的增殖、分泌和矿化,提高了成骨细胞骨形成功能.