前列腺癌患者噬菌体抗体库的构建
Construction of Phage-displayed Antibody Library from Patients with Prostatic Carcinoma
摘要[目的]构建前列腺癌患者的噬菌体抗体库,为前列腺癌特异性的人源性抗体 Fab片段的筛选及其应用奠定基础.[方法]由前列腺癌患者外周血分离得淋巴细胞,完整提取其总 RNA,经 RT PCR及半套式扩增得到免疫球蛋白全部轻链和重链 Fd段基因,然后经酶切、纯化、连接等步骤克隆进载体 pComb3,并电转化大肠杆菌 XL1 Blue,从而构建前列腺癌患者噬菌体抗体库.[结果] 成功构建噬菌体抗体 Fab片段库,其轻链及重链 Fd段与载体 DNA的重组率分别为 87%、 79%,库容为 23.2× 107,滴度为 87× 1012 mL- 1.[结论]本研究成功构建了前列腺癌患者噬菌体抗体库.
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