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成人骨髓间质干细胞分化为神经元样细胞及与凋亡的关系

Relationship Between Apoptosis and Differentiation from Human Mesenchymal Stem Cells into Neuron- like Cells

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摘要[目的] 探讨体外诱导成人骨髓间质干细胞 (human mesenchymal stem cells, hMSC)向神经元样细胞分化过程中分化与凋亡的关系,为进一步研究延长神经元样细胞的存活时间提供基础.[方法] 从成人骨髓分离 MSC,培养扩增.以β-巯基乙醇和参芪液诱导分化,于诱导后 1、 3、 5 h分别进行免疫组化鉴定神经元烯醇化酶( NSE)、神经丝蛋白( NF)、胶质纤维酸性蛋白( GFAP)的表达,计数神经元样细胞,计算分化率.采用 TUNEL方法分别检测诱导后 1、 3、 5 h的细胞凋亡率,并分析两者是否相关. [结果] hMSC经β-巯基乙醇和参芪液诱导后,可见神经元样细胞.免疫组化显示诱导出的神经元样细胞表达 NSE、 NF阳性、 GFAP阴性.神经分化的定量分析显示诱导后 1、 3、 5 h,经β-巯基乙醇诱导 NSE、 NFH阳性细胞分别为 43.5%± 1.8%, 59.3%± 2.2%, 76.5%± 2.3%和 42.6%± 1.9%, 55.1%± 2.1%, 73.5%± 2.3%.参芪液诱导 NSE、 NFH阳性细胞分别为 49.5%± 1.9%, 62.3%± 2.1%, 79.5%± 2.5%和 45.6%± 1.9%, 59.1%± 2.1%, 76.5%± 2.3%.经两种诱导剂诱导后 1、 3、 5 h, TUNEL检测两者的凋亡率分别为 1.5%, 6.5%, 19.5%和 0.5%, 2.3%, 12.5%.[结论] β-巯基乙醇和参芪液均可在体外诱导 hMSC分化为神经元样细胞. hMSC向神经元样细胞分化过程中也发生凋亡,分化率与凋亡率相关.参芪液可提高分化率,降低凋亡率.