换一批
换一批实时荧光定量PCR检测原发性肝癌中PRL-2基因的表达
Real-time Fluorescence Quantitative PCR in Detecting PRL-2 Gene Expression in Hepatocellular Carcinoma
摘要[目的]建立TaqMan实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肝细胞再生磷酸酯酶2(PRL-2)mRNA表达水平,并应用该法检测原发性肝细胞癌中PRL-2基因的表达.[方法]构建含PRL-2基因开放阅读框架的T载体,制作标准曲线.提取手术切除12例人肝癌、门静脉癌栓(PVTT)和癌旁组织总RNA并逆转录为cDNA.应用实时荧光定量PCR法观察人肝细胞癌组织和门静脉癌栓及癌旁组织中PRL-2的表达水平.[结果]线性检测范围达5个数量级,最低检测下限为1×102拷贝,最高检测上限为1×106拷贝.PRL-2在所有的门脉癌栓及10例肝癌组织表达,仅在4例癌旁组织中表达.门脉癌栓PRL-2 mRNA表达水平显著高于肝癌及癌旁组织(P＜0.01),肝癌组织表达显著高于癌旁组织(P＜0.01).[结论]实时荧光定量PCR可以准确定量测定PRL-2基因的表达;PRL-2基因在门脉癌栓的更高表达提示其在肝细胞癌的发生、转移中可能起重要作用.
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分类号
R392.11
栏目名称
临床研究
DOI
10.3321/j.issn:1672-3554.2007.06.024
发布时间
2008-01-14
基金项目
国家自然科学基金
东省科技计划项目
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