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亚洲牛带绦虫钙调神经磷酸酶B基因的原核表达和免疫学分析

Prokaryotic Expression and Immunoreactivity Analysis of Recombinant Protein of Calcineurin B Gene from Taenia Saginata Asiatica

摘要[目的]对亚洲牛带绦虫钙调神经磷酸酶B基因(CaN)进行克隆、表达和免疫学初步研究.[方法]将亚洲牛带绦虫成虫钙调神经磷酸酶B基因克隆到原核表达质粒pET-30a(+)中,在大肠杆菌BL-21/DE3中用诱导表达,表达产物通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定,用镍离子金属螯合剂亲和层析柱进行纯化,纯化的重组蛋白用蛋白印迹进行免疫学分析.[结果]PCR、双酶切及DNA测序结果均表明重组质粒pET-30a(+)-Ta CaN构建成功.SDS-PAGE结果表明目的基因能在大肠杆菌BL-21/DE3中表达,经亲和层析得到了纯化重组蛋白.重组蛋白能被感染了亚洲牛带绦虫的猪和患者的血清识别.[结论]亚洲牛带绦虫成虫钙调神经磷酸酶B基因可在原核表达系统中获得具有免疫学活性的表达.为进一步研究该蛋白的功能奠定了基础.

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