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彗星试验检测大鼠死后肾脏细胞DNA含量与死亡时间的关系

Relationship between DNA of Rat Kidney and Post by Comet Assay

摘要[目的] 探讨特定条件下,利用彗星试验测定SD大鼠死后6 ~ 48 h肾脏细胞DNA含量与死亡时间的关系.[方法] 健康成年雌性SD大鼠,按取材时间随机分为6组,每组3只.颈椎脱臼法处死动物,置于25.1 ℃(广州地区近5年10月份平均气温)培养箱中,分别于0、6、12、24、36、48、60 h取大鼠肾脏组织,制备单细胞悬液,进行彗星试验,荧光显微成像系统采集图像,采集相关参数(Comet 4.0)并进行Kruskal-Wallis检验. [结果] 死后6 ~ 48 h,SD大鼠肾脏细胞DNA碎片随死亡时间延长而增加,尾长在死后各时间点依次呈明显的增长趋势,Oliver尾矩和尾DNA随死亡时间的延长,亦有一定的增长趋势,60 h未能测出.Kruskal-Wallis检验显示:各时间点彗星尾长均数的差异有高度显著性(P<0.01);彗星尾矩均数在死后6 h和12 h差异无统计学意义(P>0.05),24 h和36 h彗星尾矩均数差异有显著性(P<0.05);尾DNA均数在6 h,12 h,24 h三个时间点差异无显著性(P>0.05),但与36 h,48 h尾DNA均数的差异均有显著性(P<0.05).[结论] SD大鼠肾脏细胞DNA降解随死亡时间延长而增加,彗星试验技术为死亡时间推断提供了重要的实验依据.

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