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司坦唑醇对雌激素受抑的青春期大鼠生长板软骨细胞生长和成熟的影响

Effects of Stanozolol on Proliferation and Differentiation of Cul tured Growth Plate Chondrocytes from Pubertal Female Rat Treated with GnRHa In Vitro

摘要[目的] 探讨司坦唑醇(ST)对离体培养的促性腺激素释放激素拟似物(GnRHa)处理后青春期大鼠生长板软骨细胞的增殖和分化的影响. [方法] 将6只经GnRHa 处理后雌鼠的原代软骨细胞分为时效组(观察ST干预时限的影响)、量效组(观察ST干预剂量的影响).时效组和量效组中,又分为ST干预时效组,对照时效组;ST干预量效组,对照量效组.通过噻唑兰比色分析法(MTT)法和免疫组化法检测软骨细胞核增殖细胞核抗原(PCNA)、胞浆中Ⅱ型胶原、Ⅹ型胶原的表达.[结果] (1)对MTT、PCNA的影响改变①时效组:ST 作用后1 天2参数已有显著升高(P < 0.05),并与基值比较,第2 天时达峰(P < 0.001).但第4下降至与0 天时比较无差异(P > 0.05).②量效组:低浓度的ST无显著促增殖效应(P > 0.05),而浓度增加至10-9 mol/L时促增殖效应显现(P < 0.01),进一步加大ST 浓度至10-5 mol/L,促增殖效应又开始减弱.(2)对软骨细胞胶原Ⅱ、Ⅹ合成的影响:①时效组:ST作用3 d后胶原Ⅱ的表达明显高于对照组(P < 0.05),但至第5 天却表达显降.ST 作用3 d内胶原Ⅹ分泌量与对照组比较无差异,4 d起显著递增(P < 0.001).②量效组:ST各个浓度点的软骨细胞胶原Ⅱ表达较基值均明显增加(P < 0.01),并以10-9 mol/L 最显.10-11 mol/L ~ 10-8 mol/L 的ST不增加胶原Ⅹ表达,至10-7 mol/L 始随剂量增加而增,10-5 mol/L 时达最高值(P < 0.01).量、时效影响Ⅹ型胶原表达增加均迟于Ⅱ型,作用呈错峰性改变.[结论] ST以时效和量效作用方式分别对雌激素受抑的离体青春期大鼠生长板软骨细胞的增殖呈双相影响,在合适的剂量和时间时,细胞增殖效应可达最好效果.

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