换一批
换一批原发性肝癌组织双向电泳技术优化
Establishment of Two-Dimensional Polyacrylamide Gel Electrophoresis Techniques for Hepatocellular Carcinoma Tissues
摘要[目的]优化双向凝胶电泳的实验步骤,总结出一套适用于原发性肝癌组织的双向凝胶电泳技术.[方法]对双向电泳实验中的关键环节:样本处理、上样方法、聚焦条件等进行研究与优化,考马斯亮蓝染色后进行凝胶图像比较.[结果]采用7 mmol/L尿素、2 mol/L硫脲、40 g/L CHAPS、100 mmol/L DTT、5 g/L(pH 3-10)IPG buffer,1 mmol/L PMSF作为裂解液,丙酮沉淀蛋白,主动水化上样法,聚焦电压达到140 kV可以得到分辨率高、重复性好的结果.[结论]上述改良提高了2-D图谱中蛋白位点的分辨率和重复性,为原发性肝癌组织的蛋白质组学研究奠定了基础.
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主题词
电泳(Electrophoresis)组织(Tissues)蛋白质组学(Proteomics)电泳, 凝胶, 双向(Electrophoresis, Gel, Two-Dimensional)方法(Methods)
分类号
R34
发布时间
2010-09-30
基金项目
国家自然科学基金面上项目
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