HLA-A*0201转基因小鼠侵袭性肺曲霉病模型的建立与鉴定

Establishment and Identification of an Invasive Pulmonary Aspergillosis Mouse Model in HLA-A * 0201 Transgenic Mice

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摘要[目的]建立HLA-A* 0201转基因小鼠侵袭性肺曲霉病模型,并进行实验室鉴定.[方法]在真菌孢子感染前,给予HLA-A*0201转基因小鼠腹腔注射环磷酰胺.乙醚麻醉后,小鼠经鼻腔吸入3组不同浓度的(3×106、3×107、3×108mL-1)烟曲霉孢子悬液.阴性对照组小鼠吸入PBS.感染后36 h,处死各组小鼠,取肺组织病理行HE、PAS以及GMS染色分析,以验证感染是否成功并计算肺侵袭性肺烟曲霉感染小鼠模型成模率.肺组织研磨涂皿后行菌落计数,分析小鼠肺烟曲霉负载量.[结果]小鼠肺组织病理检查显示,正常肺组织结构遭到显著破坏,大量菌丝生长并可见菌丝侵犯血管现象,证实侵袭性肺曲霉病模型造模成功.在免疫抑制的方法和条件恒定时,3种孢子浓度由低到高成模率分别为36.7％、76.7％、96.7％.各实验组成模小鼠肺组织研磨液在PDA培养基上均有大量烟曲霉菌落生长,未感染小鼠组未见烟曲霉菌落生长.[结论]成功建立HLA-A* 0201转基因小鼠侵袭性肺曲霉病模型,在免疫抑制的方法和条件恒定时,模型成模率与接种孢子悬液的浓度成正比,采用高浓度的孢子悬液(3×108 mL-1)时,可以达到较高的成模率.