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微小RNA-200a&c在改善广州管圆线虫诱导的Balb/c小鼠脱髓鞘性视神经炎中的作用

Protective Effect of MicroRNA-200a&c on Angiostrongylus cantonensis-induced Demylinating Optic Neuritis in Balb/c Mice

摘要[目的]探讨过表达miRNA-200a&c后对广州管圆线虫诱导的Balb/c小鼠脱髓鞘性视神经炎的保护作用.[方法]选取2~3周SPF级Balb/c小鼠分成4组,即正常组,广州管圆线虫感染7 d、14 d、21 d组.分别记录不同时间分组小鼠的体质量及其生存情况,并对小鼠进行神经行为学评分及视觉评分.视觉诱发电位(VEP)检测不同时间分组小鼠视觉损伤情况.透射电镜观察不同时间分组小鼠眼球组织结构变化.广州管圆线虫感染第7天时通过立体定位注射向小鼠侧脑室注射miRNA-200a&c外源性类似物,同时将小鼠分为正常组,广州管圆线虫感染21 d组、广州管圆线虫感染+阴性对照(NC)组、广州管圆线虫感染+过表达miRNA-200a&c类似物组.VEP检测以上分组小鼠视觉损伤情况.透射电镜观察以上分组小鼠眼球组织结构变化.免疫荧光检测以上分组小鼠眼部视网膜神经节细胞(RGCs)及视神经少突胶质细胞(OLs)的数量变化.[结果]广州管圆线虫感染第21天,部分Balb/c小鼠眼睑完全闭合(32.52±4.67)%或出现眼球萎缩(15.79±3.23)%等现象,同时出现小鼠体质量下降(21 dpi:P<0.05)和神志不清等表现,感染21 d组小鼠神经行为学评分明显降低,转棒实验时长缩短68%(21 dpi:P<0.01),部分小鼠出现偏瘫而无法正常行走,甚至部分出现行动迟缓、共济失调、定向障碍;另外有部分小鼠出现刺激感觉反应迟钝,单侧视力缺失,视动反应阈值下降83%,视觉功能明显下降(21 dpi:P<0.05).VEP结果显示广州管圆线虫感染21 d时Balb/c小鼠潜伏期与正常组相比轻度延长(21 dpi:P<0.05),且多为单侧眼部发病.过表达miRNA-200a&c后,与感染21 d组相比,VEP检测结果显示,P1波潜伏期明显缩短(P<0.05);透射电镜结显示视网膜神经节细胞胞质肿胀情况较感染21 d组对比有所减轻,视神经髓鞘结构较感染21 d组对比相对紧密,厚度也较均匀(P<0.05);免疫荧光结果显示RGCs和OLs数量较感染21 d组相比细胞数量明显升高且细胞排列紊乱的现象也有所改善(P<0.05).[结论]广州管圆线虫感染Balb/c小鼠后引起脱髓鞘性视神经炎,过表达miRNA-200a&c可减轻脱髓鞘性视神经炎造成的损伤,改善小鼠眼部损伤.

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