换一批
换一批球等鞭金藻△5去饱和酶基因IgD5在拟南芥中的功能鉴定
Functional Characterization of Isochrysis galbana △5 Desaturase Gene IgD5 in Arabidopsis thaliana
摘要从球等鞭金藻中克隆到一个△5去饱和酶基因,命名为IgD5.系统发育树分析表明,该基因编码产物与来源于巴夫藻Pavlova salina的△5去饱和酶亲缘关系最近.此前通过酿酒酵母表达系统,证明IgD5对ω6脂肪酸具有△5去饱和酶活性,但并未鉴定IgD5对ω3脂肪酸的催化活性.我们将IgD5转化能够内源合成二高-γ-亚麻酸(DGLA,20∶3△8,11,14)和二十碳四烯酸(ETA,20∶4△8,11,14,17)的已携带2个基因的拟南芥(简称TMA2),通过PCR及RT-PCR筛选阳性植株,提取转基因阳性植株叶片总脂肪酸,用气相色谱分析法检测到花生四烯酸(AA,20∶4△5,8,11,14)和二十碳五烯酸(EPA,20∶5△5,8,11,14,17),含量分别达7.44％和2.07％,转化效率分别为68％和60％,证明IgD5在转基因植物中具有△5去饱和酶的活性,对ω3/ω6脂肪酸没有明显偏好性,并且催化活性远高于其在酵母中的活性.在转IgD5的TMA2中除了AA和EPA,没有检测到其他新脂肪酸,表明IgD5底物专一性很强,是一个可用于植物转基因替代生产鱼油的良好基因.
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关键词
球等鞭金藻△5去饱和酶花生四烯酸二十碳五烯酸ω3脂肪酸拟南芥Isochrysis galbana△5 desaturaseArachidonic acidEicosapentaenoic acidω3 fatty acidsArabidopsis thaliana
栏目名称
研究简报
DOI
10.3724/SP.J.1006.2013.00928
发布时间
2013-10-28
基金项目
国家自然科学基金项目
国家转基因生物新品种培育重大专项
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