换一批对绿盲蝽具有杀虫活性Bt菌株的筛选及Cry15Aa蛋白活性的研究
Screening of Bt isolates with insecticidal activity against Apolygus lucorum (Heteroptera:Miridae)and bioassay of Cry15Aa polypeptides
摘要Bt 棉有效控制了棉田主要害虫棉铃虫（Helicoverpa armigera ），然而原来处于次要地位的刺吸式口器害虫盲蝽（Heteroptera：Miridae）为害逐年加重，目前对绿盲蝽（Apolygus lucorum Meyer-Dür）有效的抗虫基因未见报道。本研究以本实验室保存的 Bt 杀虫基因和菌株为材料，对绿盲蝽进行杀虫活性筛选。利用本实验室先前克隆的Mtx 类杀虫基因 cry15Aa 表达产物进行绿盲蝽杀虫活性测定，研究结果显示 Cry15Aa 蛋白对绿盲蝽具有一定的杀虫活性。通过杀虫活性测定，获得对绿盲蝽有效的 Bt 菌株20株；对这些菌株表达蛋白进行质谱鉴定，LC-MS／MS质谱鉴定结果显示，这些菌株可能含有 Cry1Aa、Cry1Ab、Cry1Ac、Cry1Ae、Cry1Af、Cry1Ag、Cry1Ah、Cry1Ba、Cry1Be、Cry8Ha 等十余种对鳞翅目、鞘翅目害虫有杀虫活性的蛋白片段，并且有4株 Bt 菌株样品中检出了 Mtx 类杀虫蛋白 Cry15Aa 的片段。但是进一步基因鉴定结果表明，这4株菌株并不含有 cry15Aa 全长基因，推测这些菌株中含有 Cry15类的新基因。上述研究结果表明这些菌株中可能存在对盲蝽有效的新型杀虫蛋白。本研究在发现了 cry15Aa 基因所表达的蛋白对绿盲蝽具有杀虫活性的同时，获得了对绿盲蝽具有杀虫活性的 Bt 新菌株，对绿盲蝽的生物防治具有重要的意义。
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关键词
苏云金芽胞杆菌绿盲蝽杀虫活性二级质谱鉴定Cry15Aa蛋白Bacillus thuringiensisApolygus lucoruminsecticidal activityLC-MS/MS identificationCry15Aa pol-ypeptides
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.0529-1542.2016.03.009
发布时间
2016-06-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
转基因生物新品种培育科技重大专项（2014ZX0800912B）
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